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编号:13346728
莫西沙星可浓度依赖性增加人气道平滑肌细胞Caveolin—1的表达(2)
http://www.100md.com 2019年3月25日 《中外医疗》 2019年第9期
     1 资料与方法

    1.1 一般资料

    莫西沙星(德国拜耳医药保健股份公司),Cav-1人抗山羊单克隆抗体(16447-1-AP,proteintech公司),二抗山羊抗兔IgG H&L (HRP) (ab6721,abcam公司),HSMC(3410-c,sciencell,上海武光生物科技有限公司),平滑肌细胞培养液(1101,sciencell,上海武光生物科技有限公司),荧光定量检测试剂盒(RR420A,上海驰勇生物科技有限公司)。

    1.2 方法

    ①HASMC的培养及传代:购买得到HASMC原代细胞,贴壁法进行细胞培养,以胰酶消化法进行HASMC传代并自然纯化细胞,实验取5-6代细胞。

    ②Western blot检测Cav-1蛋白表达:用不同浓度(5,10,20 mg/L)莫西沙星处理HASMC 48 h,空白对照组应用生理盐水处理48 h,提取细胞总蛋白,经电泳、转膜后杂交,一抗为Cav-1人抗山羊单克隆抗体 ......
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