EDNRB基因真核表达载体的构建及其对MCF-7细胞增殖的影响(2)
1.1 材料人乳腺癌細胞株MDA-MB-231、MCF-7购自中科院上海细胞库;MEM培养基购自Gibco公司;L-15培养基购自美国Hyclone公司;ExTaq DNA聚合酶、胶回收试剂盒、限制性内切酶KpnI、Sal I及T4 DNA连接酶购自Takara公司;反转录试剂盒、DH5α感受态细胞购自全式金公司;TRIzol、OPTI-MEM、LipofectaminTM3000脂质体转染试剂盒购自Invitrogen公司;真核表达载体pCI2由齐齐哈尔医学院蛋白质结构与功能研究室惠赠。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养MDA-MB-231细胞于含10%胎牛血清的L15培养基、37℃、无CO2的饱和湿度下培养,MCF-7细胞培养在含10μg/mL胰岛素、10%胎牛血清和1%的双抗(100 U/mL青霉素,100 mg/L链霉素)的MEM培养基中、于37℃、5% CO2条件下培养 ......
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