秦威， 阮镜良， 梁铭， 许晓琳， 田晶， 杨海云， 罗葆明

    510120广州,中山大学孙逸仙纪念医院 超声科(秦威， 阮镜良， 梁铭， 许晓琳， 田晶， 杨海云， 罗葆明)

    基础研究?

    热消融不全后残存肝癌细胞HepG2生物学特性变化的实验研究*

    秦威， 阮镜良， 梁铭， 许晓琳， 田晶， 杨海云， 罗葆明△

    510120广州,中山大学孙逸仙纪念医院 超声科(秦威， 阮镜良， 梁铭， 许晓琳， 田晶， 杨海云， 罗葆明)

    目的： 探讨热消融不全后残存肝癌细胞HepG2的生物学特性变化。方法：47℃热处理肝癌细胞株HepG2 5min，7.5min，10min，HepG2为正常对照组，倒置光学显微镜下观察热消融不全后残癌细胞的形态变化；(MTS法检测残癌细胞继续培养24h，48h，72h后的OD值，观察其增殖能力；Transwell法检测残留癌细胞迁移能力；残癌细胞进行单细胞培养10 d，观察克隆形成能力。结果：随着热处理时间的延长，发生凋亡的HepG2癌细胞增多；残留癌细胞在24h内的增殖能力增强，随后48h-72h时间段增殖速率降低；迁移能力随热处理时间延长增强，克隆形成能力随热处理时间延长减弱。结论： 热消融不全后残存肝癌细胞HepG2生物学特性发生了变化，在一定时间内增殖速度增快，随后恢复至正常，随着热处理时间的延长其迁移能力增强，但克隆形成能力则下降。

    热消融； 肝癌； 复发； 转移

    热消融治疗是肝癌非手术治疗的主要手段之一，在临床上已广泛开展。研究表明经热消融治疗的肝癌患者生存率较其他局部治疗方式高[1-2]，但复发率仍然较高[3-4]。消融不全治疗后复发转移成为影响预后及威胁患者生命的主要原因，肿瘤的生物学特性是决定肝癌复发和转移的关键因素， 那么消融不全后肝癌细胞的生物学特性是否发生了改变？本研究拟利用肝癌细胞株HepG2进行热处理不全后对其形态变化，增殖，迁移，克隆形成能力进行研究。

    1 材料和方法

    1.1 细胞培养及热消融不全处理

    肝癌细胞株HepG2细胞购于中山大学动物实验中心，使用含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基培养，置于37℃含5%CO2浓度的培养箱中培养，细胞达80% 融合度时进行传代。将达80% 融合度的HepG2细胞用胰酶消化，进行计数，以8×105接种于25cm2的培养瓶贴壁过夜。更换新鲜培养基后，将细胞置于47℃水浴箱中，处理5min，7.5min，10min(热处理后HepG2细胞简称为HepG2-H) ......