李静，吴东明， 喻叶，王越峰，许颖

    610500 成都，成都医学院第一附属医院 检验科

    腹盆腔恶性肿瘤是发生率最高的恶性肿瘤之一，放射疗法在腹盆腔恶性肿瘤患者治愈和姑息治疗中扮演重要角色[1]。尽管随着放射物理学和技术的发展，放疗在“物理精准”上已经取得了很大进步，但“物理精准”方法仍然无法彻底解决辐射对正常组织毒性作用的问题[2]。在放射治疗腹内或盆腔恶性肿瘤时，辐射场不可避免地会包括健康肠道，引发不良后果，随后表现为辐射诱导的肠损伤[3]。据报道，接受腹内或盆部放疗后的患者，约60%～80%会出现急性消化道不适症状，其中，约50%的患者会出现不同程度的慢性肠功能障碍[3]。放射性肠损伤过程复杂，发生机制尚不明确。近年来，越来越多的证据表明炎症在放射性肠损伤中起重要作用[3-4]。细胞焦亡是近年来新发现的一种依赖半胱天冬酶活化的促炎程序性细胞死亡方式，以细胞肿胀裂解并伴随大量促炎因子释放为主要表现形式[5],但胱天蛋白酶1 (cysteinyl aspartate specific protease 1,Caspase-1) 介导的细胞焦亡是否参与放射性肠炎的发生发展，至今尚少见相关报道。因此，本研究拟结合动物和细胞水平探讨Caspase-1信号通路介导的细胞焦亡在放射性肠炎中的作用，为开发预防或缓解性治疗提供新的思路。

    1 材料和方法

    1.1 实验材料

    6～8周龄，雌性BALB/c小鼠，体重(18±2)g，购于达硕动物科技有限公司，动物饲养严格遵守实验标准进行。正常人肠上皮细胞株(normal human intestinal epithelial cells，HIEC)为本课题组保存。gasdermin D的N末端(GSDMD-N)、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族3[nucleotide-binding oligomerization domain (NOD)-like receptor family,pyrin domain containing 3，NLRP3]抗体、胱天蛋白酶1特异性抑制剂(Z-YVAD-FMK，YVAD)购自Abcam公司。Caspase1、含CARD结构域凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD，ASC)、白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)、IL-1β、Caspase1-p20抗体购自CST公司。GAPDH抗体 ......