赵宗霞，苏玉强，曾娟，双婷，陈必良

    710038 西安，西安医学院第二附属医院 妇产科(赵宗霞、曾娟),麻醉科(苏玉强)； 710032 西安，第四军医大学西京医院 妇产科(赵宗霞、陈必良)；710000 西安，西安交通大学第一附属医院 妇产科(双婷)

    卵巢癌是一种严重威胁全球妇女健康的恶性肿瘤。虽然其发病率低于宫颈癌和子宫内膜癌，但其死亡率在女性妇科肿瘤中最高[1]。卵巢癌在发病早期缺乏特异性的临床表现，导致大部分患者在诊断时就已处晚期并出现转移，导致预后极差[2]。研究表明，卵巢癌的发生发展是一个多因素影响的复杂病理过程，其中卵巢癌细胞的高转移性和侵袭性导致卵巢癌发生转移[3]，而肿瘤微环境(tumor microenvironment，TME)在卵巢恶性肿瘤的发生发展中发挥重要的促进作用[4]。TME是指由环绕在肿瘤组织周围的肿瘤细胞及相关成纤维细胞、巨噬细胞、间充质细胞及炎症相关因子等组成的生物环境[5]。卵巢癌具体的发病机制尚不完全明确，研究显示肝癌、结肠癌和胃癌等肿瘤组织中，肿瘤相关的成纤维细胞(cancer-associated fibroblast,CAF)可以分泌细胞基质衍生因子、骨桥蛋白和肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor，HGF)等细胞因子促进肿瘤细胞的增殖和迁移。HGF是一种可以促进肝细胞生长的细胞因子，有文献报道其在多种肿瘤组织中都异常高表达，促进肿瘤的发生发展[6]，但是HGF在卵巢癌中的表达及与卵巢癌发生发展的关系尚不明确。因此，本研究采用卵巢癌患者肿瘤组织、癌旁组织和正常卵巢组织及卵巢癌细胞系SKOV3细胞，探讨肿瘤相关成纤维细胞分泌的HGF与卵巢癌细胞增殖是否相关。

    1 材料和方法

    1.1 组织标本

    本次研究共纳入本院妇产科2017年5月至2018年10月收治的49例卵巢癌患者及需妇科手术治疗的非卵巢癌患者40例。纳入标准：1)所有卵巢癌患者的临床表现和病理学检查结果均符合卵巢癌的诊断(依据《妇产科学》第8版)；2)卵巢癌患者均于我院首诊，且术前未经任何放化疗；3)病历资料完整。排除标准：1)依从性差；2)其他系统合并症；3)有绝对手术禁忌证。49例卵巢癌患者的年龄为32～69岁，平均年龄(41.82±7.35)岁。40例非卵巢癌患者年龄为31～71岁，平均年龄(45.28±5.91)岁。

    1.2 材料

    卵巢癌相关成纤维细胞(human endometrial carcinoma-1A cell,HEC-1A)、卵巢癌细胞SKOV3均购自中国科学院上海细胞典藏库；磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)、聚丙烯酸胺凝胶、结晶紫固体粉末购自广州科维生物技术有限公司；蛋白定量试剂盒购自美国Thermo Scientific公司；DMEM培养液、胰蛋白酶及胎牛血清购自美国Hyclone公司；双抗及4%多聚甲醛购自西安科昊有限公司 ......