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编号:1454600
乙型肝炎病毒表面抗体化学发光定量检测方法的建立
http://www.100md.com 2010年3月28日 实验与检验医学 2010年第6期
定标,缓冲液,1材料与方法,2结果,3讨论
     王小明,刘 平

    (1、萍乡市人民医院,江西 萍乡 337055;2、重庆医科大学,重庆 400014)

    乙型肝炎由乙型肝炎病毒 (Hepatitis B Virus,HBV)引起的是世界性传染病,主要通过血液、血制品、性传播及母婴传播,是引起肝硬化和肝癌的常见病因。乙型肝炎病毒表面抗体(HBsAb)是乙型肝炎病毒表面抗原HBsAg刺激机体产生的特异性抗体,是机体对乙肝病毒产生免疫力的保护性抗体,在肝炎或注射疫苗后产生,是机体对乙肝病毒产生抵抗力的标志[1-3]。通过对血清或者血浆中HBsAb的检测,可用于监测乙肝疫苗的效果评估或是对乙肝患者病情转归的观察。现行的酶联免疫法(ELISA)在临床实验室广为使用,但存在不能定量的缺点,不能及时提醒HBsAb低滴度人群再次接受疫苗免疫。而放射免疫法(RIA)存大有效期短,操作繁琐,环境污染,线性范围窄等缺点。化学发光免疫测定(CLIA)是一种具有广阔发展前景的非放射标记微时定量测定技术[4-5],国外已成功应用,2000年以来,国内一些生物公司也相继研发出了各种化学发光定量测定试剂盒,本研究旨在建立乙型肝炎病毒表面抗体 (HBsAb)化学发光定量检测方法。

    1 材料与方法

    1.1 材料与试剂 纯化HBsAg购自美国Fitzgerald 公司;ALP, NaIO4,NaBH4,乙二醇购自 Sigma 公司;Abbott AxSYM系统及配套试剂为美国雅培公司;HBsAb国家定量参考品 (0408-871)和PANEL(0408)购自中国药品生物制品检定所;96孔白色化学发光板购自NUNC公司;化学发光免疫分析仪器(BHP9504)购自北京源德生物工程有限公司;标本为空腹静脉采血4~5ml ......

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