伍启康，吴奎海，崔东岚

    (佛山市第一人民医院检验科，广东 佛山528000)

    嗜麦芽窄食单胞菌是一种广泛存在于自然界和医院环境的条件致病菌，随着广谱抗生素和免疫抑制剂的广泛使用，以及侵入性治疗技术的不断应用，该菌已成为院内感染的重要病原菌之一，在非发酵菌的分离率中仅次于鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌[1]，复方新诺明是临床抗嗜麦芽窄食单胞菌感染的首选用药，但近几年，临床经常能分离到耐复方新诺明的嗜麦芽窄食单胞菌，其耐药性常和I类整合子中的sul1基因[2]以及ISCR2携带的sul2相关[3]。本文主要对耐复方新诺明嗜麦芽窄食单胞菌株相关基因进行检测，并对其进行基因分型。

    1 材料与方法

    1.1 菌株来源 我院2013年1月至2013年12月共分离获得126株嗜麦芽窄食单胞菌，其中对复方新诺明耐药的有22株，剔除同一患者相同部位7d内的重复分离株。

    1.2 细菌鉴定和药敏试验 法国生物梅里埃公司的VITEK2-compact仪器及其配套GN鉴定卡进行菌种鉴定，药敏试验采用K-B法。依据临床实验室标准化委员会(CLSI)2013年标准判断结果，质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌A TCC27853。

    1.3 主要仪器和试剂 德国Eppendorf公司的PCR扩增仪器，Bio-Rad公司的凝胶仪,TaqDNA聚合酶﹑dNTPs、DNA Marker、细菌基因组DNA提取试剂盒均为TaKaRa公司产品。复方新诺明药敏纸片购自英国OXOID公司，

    1.4 PCR扩增 DNA的提取参考试剂盒说明书，-40℃保存。相关基因的PCR反应体系均为20μl体积,其中含 Mg2+的 10×buffer 2μl，dNTP 200μmol/L，上下游引物 0.2μmol/L，DNA 模板 1μl，TaqDNA 聚合酶1U，加入灭菌去离子水至20μl。所扩增的sul1、sul2、ISCR1、ISCR2 阳性菌株均为本实验 PCR扩增阳性并测序验证 ......