临床微生物的快速诊断的方法学研究进展
抗原,标本,培养基,1直接临床标本的检测,2细菌培养及药敏的快速试验
王秀媛综述,刘玉英审校(宝坻中医医院检验科,天津 301800)
1 直接临床标本的检测
1.1 直接从临床标本中检测病原体成分及抗原应用单克隆抗体结合各种形式的标记技术可以检出临床标本中痕量的微生物抗原,免去细菌或病毒培养的过程,直接完成微生物感染的快速诊断。如应用斑点酶免疫测定(EIA)、荧光免疫试验(FIA)或金标法检测淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、肺炎支原体,快速、直观[1];针对结核分枝杆菌的表面抗原或脂阿拉伯聚糖(GMA)制成单抗,用酶联免疫吸附试验(ELISA)或斑点酶免疫测定(EIA)直接检测标本中的TB抗原[2],Hillemann等用CapiliaTB产品检测结核分枝杆菌MPB64抗原,在172例结核杆菌阳性的临床标本的检测中阳性检出率为97%,特异性达100%;直接检测粪便中的O157:H7大肠埃希菌抗原,Takeda等用胶体金免疫层析条直接检测水样便中的EHEC O157,报道检测限为5×l05cfu/ml,与培养法相比一致率为89.10%,与ELISA法相比一致率为87.2%,但胶体金免疫层析法用时仅5min[3];又如直接检查粪便中的幽门螺杆菌抗原(HpSA),2004年国内文献关于HpSA免疫快检卡诊断HP感染的首次报道,其敏感性为92.6%.特异性为88.5%.总的检测准确性为90.6%[4],该方法适用于幽门螺杆菌感染的大规模流行病学调查和临床诊断,也适用于HP的根除疗效观察和随访复查,更适用于老年于老人、儿童、孕妇及不宜做胃镜检查的患者,临床实验室可以把HpSA检测作为HP感染的常规检查项目,值得在临床实施和推广[5,6];美国BinaxNow肺炎链球菌抗原检测试剂盒可直接用于尿液和脑脊液标本的检测,用于肺炎球菌性肺炎和肺炎球菌性脑膜炎的诊断;还有采用各种不同载体如聚苯乙烯粒子(Latex)、明胶粒子、碳末、含蛋白A的金黄色葡萄球菌、胶体金等制成凝集试剂,直接测定粪便标本中的轮状病毒、脑脊液中的脑膜炎奈瑟菌、B型流感杆菌,以及链球菌的分群(A、B、C、D 等群)等。
真菌的检测,通过检测真菌细胞壁的β-1,3葡聚糖 (G试验),β-1,3葡聚糖在有些真菌细胞壁>50%,用动态浊度法来检测,可检测念珠菌、毛孢子菌、曲霉、镰刀霉、支顶孢霉、卡氏肺孢子菌,可用于以上真菌的早期诊断和动态反应感染程度及抗真菌治疗效果[7],研究显示敏感性和特异性分别为(63%~100%)和(74%~100%),缺陷在于容易引起假阳性,而且无法区别真菌种类[8];半乳甘露聚糖(GM试验)试验,半乳甘露聚糖是曲霉菌细胞壁成分 ......
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