刘丽 ，孙爱猛 ，罗青 ，朱端昊 ，李健雄 ，施勇 ，周信云 ，冯萍英 ，罗滢娟

    (1、吉安市疾病预防控制中心，江西 吉安 343000；2、江西省疾病预防控制中心，江西 南昌 330029)

    乙型流感病毒是引起人流行性感冒的重要病原，致病性较强，人普遍易感，只在人间传播，常呈暴发或小流行。其在世界范围内多个国家都有过流行，我国在1994年、1997年、和2000年出现乙流高峰，2005年呈引起小规模暴发[1]，近年来我市监测的流感样病例阳性标本中，乙型流感病毒占居较大比例，2016年为我市优势型别，且在2016年3月及2017年12月均出现过乙型流感病毒引起的局部流行。流感病毒的抗原漂移性强，易发生变异，及时正确掌握流感流行及变异趋势，对预防和控制流感大流行具有重要的作用。本文通过对吉安市2016年-2017年分离到的乙型流感病毒的HA(血凝素)和NA(神经氨酸酶)进行基因测序，分析其系统进化及分子变异特征，了解乙型流感病毒的基因特点，为吉安市流感流行的防控工作提供一定的科学依据。

    1 材料与方法

    1.1 样本选择我市2016年-2017年不同时间段的流感样病例监测及疑似流感疫情咽拭标本中分离到的乙型流感病毒，进行基因扩增和测序。

    1.2 病毒RNA提取采用德国QIAGEN公司的RNeasy Mini Kit对选取的乙型流感病毒毒株进行病毒RNA提取，具体步骤参考试剂说明书。

    1.3 引物 基因测序引物序列参考WHO[2]，由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。

    1.4 基因RT-PCR扩增 扩增采用Qiagen One Step RT-PCR Kit试剂盒进行RT-PCR反应，RT反 应 条 件 ：60℃ ，1min；42℃ ，10min；50℃ ，30mm；95℃，15min ......