张君娜

    (河南大学第一附属医院病理科，河南 开封475000)

    星形细胞瘤是常见的脑肿瘤，有资料[1]显示其约占脑肿瘤的45%左右，并且近年来其发病率呈逐年升高的趋势。星形细胞瘤患者采用手术治疗难以根治，预后普遍较差，这不仅与肿瘤的组织学类型有关，还有肿瘤细胞的侵袭增殖能力相关[2]。因此如何阻止肿瘤细胞的侵袭和转移是治疗星形细胞瘤的热门研究方向。乙酰肝素酶(HPA)是一类内切糖苷酶，能够将细胞外基质的组织屏障破坏，使其他物质进入基质。有研究[3]显示，多类恶性肿瘤的患者存在体内HPA异常表达的现象，在肿瘤细胞的侵袭过程中起到重要作用。故在本次试验中，观察HPA在星形细胞瘤患者体内的表达情况，并研究其对肿瘤细胞侵袭的影响，现将结果报告如下：

    1 材料与方法

    1.1 样本来源 选取2013年3月-2017年3月期间在我院行手术切除的67例脑星形细胞瘤患者的病理切片标本，切片标本均经2位病理科副高医师按WHO的《神经系统肿瘤》[4]复查审核，将其设为肿瘤组。肿瘤组：男37例，女30例，年龄26~73 岁，平均年龄(58.23±12.51)岁，病理分型：Ⅱ级21例，Ⅲ级27例，Ⅳ级19例。纳入标准：①符合星形细胞瘤的诊断标准；②年龄>18岁；③患者未接受过放化疗；④研究经我院医学伦理委员会批准。排除标准：①有精神疾病史；②有其他颅内疾病的。选择同时期39例因脑外伤在我院行颅内减压术的患者的正常脑组织，制作切片，设为正常对照组。正常对照组：男24例，女15例，年龄24~69岁，平均年龄(47.12±10.47)岁。

    1.2 仪器与试剂 主要试剂：兔抗人HPA多克隆抗体(BA1630)，购于武汉博士德生物工程有限公司。即用型非生物素免疫组化EliVisionTM plus试剂盒、DAB显色试剂盒、柠檬酸盐缓冲液，购于福州迈新生物技术开发公司。10%胎牛血清，购于杭州四季青生物有限公司。DMEM培养基，购于GIBCO公司。HPA一抗，购于Santa Crus公司。辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔IgG购于KPL公司。siRNA购于Dharmacon公司。人工基底膜基质凝胶(matrigel)购自美国BD公司。Trizol试剂盒和质粒购于Invitrogen公司。星形细胞瘤U87细胞，购于上海北诺生物科技有限公司。Transwell小室购于Costar公司 ......