电化学发光检测法在梅毒抗体确证中的应用
印迹,献血者,1材料与方法,2结果,3讨论
陈邦锐,许婷婷,张红,乐淼(武汉血液中心,湖北 武汉 430030)
梅毒是一种可以通过输血传播的疾病,在采供血机构中,属于国家规定的血液检测的项目,近几年来,无偿献血的报废统计中,因梅毒阳性而报废的比例逐渐增大[1-2],超过HCV、HIV,严重威胁到血液安全。在我国采供机构的血液筛查实验室,按照国家规定,梅毒检测必须采用两个不同厂家的酶联免疫试剂同时检测,任一试剂阳性则血液报废,因为不同厂家抗原包被工艺不一样,在检测灵敏度特异性方面有所差异,所以存在一定比例的假阳性,这不仅浪费宝贵的血液资源,也给献血者咨询反馈带来麻烦,给其带来心理困扰,甚至家庭矛盾,严重影响了社会公众对采供血机构的信任度。为此,笔者认为有必要对梅毒ELISA 初筛阳性的血液,做进一步的抗体确证,通常行业内一般采用TPPA 检测作为梅毒抗体的确证实验,但是该方法为手工操作,且人工肉眼判读,更为经典的确证方法是免疫印迹,但是印迹法价格太贵,常规难以大量使用。因此,笔者通过不同方法学比对,意图建立起适合本实验室的确证策略,既操作规范,又可以批量检测,为此引入电化学发光检测,把TPPA、电化学发光、免疫印迹的检测做一个比较,实验过程如下。
1 材料与方法
1.1 标本 我中心ELISA 法检出的331 份梅毒阳性标本包括初次双试剂阳性标本、初次单试剂阳性重复检测仍为阳性标本 (包括灰区值,S/CO>0.7)。
1.2 试剂 梅毒螺旋体双抗原夹心法试剂盒(厦门新创),批号2018097525、批号2019027504;梅毒螺旋体双抗原夹心法试剂盒 (广州丽珠),批号2018030308、批号2019010108;TPPA 试剂:日本富士瑞必欧株式会社试剂盒,试剂批号VN81025;罗氏电化学发光梅毒抗体试剂,试剂批号44379703;德国欧蒙免疫印迹梅毒抗体检测试剂 ......
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