杨亚勤，牛丽丹，孔令宇，陈希妍，任芳，杨飞云

    (新乡医学院第一附属医院急诊科，河南 卫辉 453100)

    急性胰腺炎(Acute pancreatitis，AP)是临床上常见的消化系统急性疾病，流行病学研究显示，近年来AP 的发病率呈上升趋势，且死亡率也居高不下，对人类生命安全造成严重威胁[1-2]。然而，由于AP 发病机制并不明确，临床难以取得针对性的治疗方式。研究显示微小RNA(microRNA, miRNA 非编码RNA) 在AP 患者血清中的表达出现明显差异，与AP 的发生发展及临床诊断密切相关[3-4]。郭广洋等人的研究表明，AP 患者血浆miRNA-155表达升高，其表达水平与病情严重程度密切相关[5]。动物实验结果也表明，说明miRNA-155 的表达与AP 的发生密切相关[6]。然而，miRNA-155 在AP 中的作用机制并不明确。本研究利用TLCs 诱导制造AR42J 细胞的AP 模型，检测AP 中miRNA-155 对Notch 信号通路的调控作用，初步探索miRNA-155的作用机制，为临床AP 的治疗提供参考。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞 大鼠胰腺AR42J 腺泡细胞购自于中国科学院上海生命科学研究院细胞资源中心。

    1.1.2 主要试剂F12K 培养液购自于Sigma 公司，优质胎牛血清购自于Gibco 公司，牛磺胆酸钠盐(TLCs) 购自于Sigma 公司，Notch1 抗体，Bcl-2 抗体，Bax 抗体，Caspase-3 抗体购自于Abcam 公司，GAPDH 抗体购自于Sigma 公司。Lipofectamine 2000 转染试剂，逆转录试剂盒购自于Invitrogen 公司。microRNA-155 inhibitor，microRNA-155 negative control，pcDNA-Notch1，pcDNA negative control购自于苏州吉玛基因公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 AR42J 细胞的培养 大鼠胰腺AR42J 细胞培养于的F12K 培养液中，培养液中含20%胎牛血清及青霉素100 U/mL，链霉素0.1 mg /mL ......