内异康复片对子宫内膜异位症异位和在位内膜血管形成相关因子的实验研究
1材料与方法,1实验动物,2实验药物,3实验试剂,4实验仪器,5分组及给药,6标本的采集与处理,7异位和在位内膜VEGF和ENS的染色及检测,8异位和在位内膜MVD的检测方法,9统计学分析,2
魏绍斌 王妍 李白雪子宫内膜异位症(endometriosis, EMT)是妇科疑难病症,主要表现为盆腔疼痛、痛经、不孕、月经异常等,严重影响女性的身体健康和生活质量。尽管其发病机理复杂,但越来越多的研究表明,血管形成在EMT的发生发展中起着重要的作用[1]。血管形成取决于血管形成刺激因子和抑制因子之间,以及效应细胞(主要是血管内皮细胞)与细胞外基质之间的相互平衡。血管形成相关因子通过直接、间接或各因子之间的相互作用,促进了EMT发生、发展。成都中医药大学附属医院妇科魏绍斌等以湿热瘀结立论,拟定了“清湿化瘀、行气止痛、消癥散结”治法,研制出院内制剂内异康复片,通过实验研究检测EMT大鼠异位和在位内膜血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑制素(ENS)、血管内皮生长因子/内皮抑制素(V/E)、微血管密度(MVD)及微血管数目的表达,探讨内异康复片对EMT模型大鼠异位和在位内膜的不同影响及其作用环节和靶点,初步阐明其治疗EMT抗血管生成的作用机理。
1 材料与方法
1.1 实验动物
健康性成熟未交配过的雌性SD大鼠,60只,体重180~250 g,一级动物,检疫合格,由成都中医药大学实验动物中心提供,批号:SCXK(川2008-11),合格证号:川实动管质第6351号。
1.2 实验药物
内异康复片浸膏:按成人每日用量3 g/kg体重计算,每毫升浸膏制剂含3 g生药。由成都中医药大学附属医院制剂科制备。丹莪妇康煎膏(中药阳性对照药物):成人每日用量0.5 g/kg体重,由昆明滇虹药业有限公司出品,国药准字:Z20025253,产品批号:080601。丹那唑胶囊(西药阳性对照药物):按成人每日用量600 mg/60 kg体重计算,由上海华联制药有限公司出品,国药准字:H31021681,产品批号:080305。
1.3 实验试剂
一抗:VEGF(BA0407)Rabbbit polyclonal IgG,200 μg/ml;ENS (BA1609) Rabbit polyclonal IgG,200 μg/ml;CD31 (BA2211) Rabbit polyclonal IgG ......
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