基于DNA条形码—产地—形态分析联用的巴西草药PIC?O(鬼针草)的鉴定及生药学研究
药材,1材料与方法,1实验材料,2试剂,3仪器,4DNA提取及PCR扩增,5序列分析方法,6基于DNA条形码的鉴定方法,7基于产地分析的鉴定方法,8基于形态分析的鉴定方法,9
顾选 张晓芹 宋晓娜 李妍芃 韩丽 赵百孝 刘春生 马长华 哈略鬼针草类药材均来源于菊科管状花亚科鬼针属Bidens L.植物,为一年生草本植物。鬼针草类药材药用历史悠久,为许多国家使用。中国的鬼针草药材来源有鬼针草B.pilosa、金盏银盘B.biternata、小花鬼针草B.parviflora等植物的干燥全草[1],其具清热解毒、活血散瘀功能,主治上呼吸道感染、咽喉肿痛、急性黄疸型传染性肝炎等[2]。巴西号称“植物王国”,境内植物资源居世界首位。在巴西的部落里,鬼针草药材(PIC?O)的应用也十分广泛。通过调查,巴西鬼针草具有利尿,净化血液,消炎,保护肝脏,抗病菌,抗原生动物,退烧解热作用,用于治疗黄疸病、泌尿感染,阴道感染以及皮肤病的辅助治疗等。比较中巴鬼针草的治疗作用和临床应用情况,有利于促进中国和巴西的医学交流,扩大草药的用药范围。但是,巴西鬼针草来源尚不明确,限制了草药的开发利用。
DNA条形码技术具有鉴别无背景信息中药材的优势,能够准确鉴别到属、种水平,产地和形态特征能进一步验证DNA条形码鉴定结果[3]。本研究通过DNA条形码技术—产地—形态分析联用的方法对巴西鬼针草进行基原鉴定研究,明确药材的来源。通过性状鉴别和显微鉴别法对巴西鬼针草进行生药学研究,从器官、组织和细胞三个层次为药材鉴别提供依据,对药材的开发利用和质量控制具有重要意义。
1 材料与方法
1.1 实验材料
2012年4月采购巴西药用鬼针草3批,购自巴西隆城市场。样品的凭证标本保存于北京中医药大学大学标本室。
1.2 试剂
广谱植物基因组DNA快速提取试剂盒(北京博迈德生物有限公司,批号:69632855)、Taq酶等PCR试剂(上海生工生物工程有限公司,批号:695673BE)、乙醇、琼脂糖、ddH2O 等。
1.3 仪器
SIGMA3K-15低温高速离心机(SIGMA公司),TECHNE TC-3000PCR扩增仪,Bio-Rad电泳仪 ......
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