臧艺玫 顾选 余春霞 王娟 韩丽 吴浩忠 肖瑶 赵百孝 刘春生 马条华

    ·巴西草药研究专题·

    基于显微—DNA条形码—产地分析联用的巴西柑橘属植物药FARINHA DE LARANJA (枳壳)基原鉴定研究

    臧艺玫 顾选 余春霞 王娟 韩丽 吴浩忠 肖瑶 赵百孝 刘春生 马条华

    目的 利用显微-DNA条形码-产地分析联用的方法对巴西柑橘属植物药FARINHA DE LARANJA粉末进行基原鉴定研究。方法 应用显微鉴定的方法对药材粉末的基原进行初步判定;再提取样品DNA,扩增ITS序列,利用NCBI数据库中的BLAST功能分析相似度,对样品品种进行DNA条形码鉴定;最后结合产地信息对数据库中的序列进行筛选。结果 显微-DNA条形码-产地综合分析结果表明,该样品为芸香科柑橘属Citrus L.植物酸橙Citrus aurantium的干燥未成熟果实粉末。结论 巴西植物药FARINHADE LARANJA的鉴定可为扩大枳实、枳壳等中药材的药用资源提供依据。

    柑橘属; 药材粉末; 基原鉴定; DNA条形码

    植物药基原鉴定的基本方法包括植物文献学研究、产地调研、标本采集和实验室植物分类鉴定等[1],但对于粉末类药材,由于其植物形态特征大部分已被破坏,以上方法均难以实行。笔者在巴西市场收集药材样本时发现,一种名为FARINHA DE LARANJA的粉末类药材来源无法确定,因此有必要对该药材进行基原鉴定。

    由于不同科、属植物的显微结构具有不同特征,故可利用显微鉴别的方法初步对药材粉末进行鉴定[2];DNA条形码技术具有准确、快速、能鉴别无背景信息物种的优点[3-5],可对属内植物进行较为准确的鉴定;最后结合该属植物在产地的分布状况,可完成药材粉末的基原鉴定。本文拟采用显微-DNA条形码-产地分析联用的方法对FARINHA DE LARANJA粉末进行基原鉴定,以期为扩大柑橘属药用资源提供依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    FARINHA DE LARANJA样品10份,每份200 g, 2012年4月购买于巴西隆城市场药材集散地,样品的凭证标本保存于北京中医药大学标本室。

    1.2 试剂

    广谱植物基因组 DNA快速提取试剂盒(北京博迈德生物有限公司,批号:69632855)、rTaq酶(上海生工生物工程有限公司,批号:695673BE)、乙醇(北京化工厂,批号:1124120381060079)、琼脂糖(BIOWEST,批号:142045)、ddH2O等 ......