徐文英 马恺悦 冯孟鑫 顾选 李妍芃 赵百孝 刘春生 马长华 韩丽

    车前草为车前科Plantaginaceae植物车前Plantago asiatica L.或平车前Plantago depressa wild.的干燥全草，是2010年版《中华人民共和国》(一部)收载的常用中药。车前草性寒，味甘，具有清热利尿、祛痰、凉血、解毒之功效，用于水肿尿少、暑湿泻痢、痰热咳嗽、痈肿疮毒等症[1]。TANCHAGEM为巴西的常用草药，根据《葡汉词典》[2]，TANCHAGEM 在葡萄牙语中意为车前草，其药物性状与功能主治也与中药车前草类似，但由于巴西各地区间发展不平衡，其民族药的研究开发往往存在缺少文献记载、品种混乱、基原不清、品质不详等现象[3]。因此，为解决上述质量控制中存在的问题，本课题组对巴西草药TANCHAGEM进行全面的质量研究，提出了一种新型研究思路“二维特征鉴别法”，即从药物本身的化学特征和遗传学特征两方面入手，先采用DNA条形码技术对药物的基原进行确定，解决“真伪问题”;再通过HPLC技术对药物的化学信息进行检测，解决“优劣问题”。

    首先采用DNA条形码技术并利用ContigExpress软件，检索NCBI中注册的与巴西草药相似度最高的物种，以相似度97%以上为物种溯源依据，确定其基原。其次以车前草的专属性成分大车前苷为其指标成分，利用HPLC法比较巴西草药TANCHAGEM与中药车前草中大车前苷的含量，综合两者结果为巴西草药TANCHAGEM及相关制剂的质量标准制订提供科学依据[4-10]。

    1 材料与仪器

    1.1 材料

    药材:巴西草药TANCHAGEM三份(巴西隆城市场)，样品的凭证标本保存于北京中医药大学大学标本室;中药车前草(北京市花家地南里同仁堂药店，经北京中医药大学刘春生教授鉴定为车前科植物车前Plantago asiatica L.的干燥全草)，大车前苷(中国药品生物制品鉴定所，批号:111833-201102)。试剂:乙腈(色谱纯，Fisher)，甲醇(色谱纯，Fisher)，娃哈哈纯净水，液氮。

    1.2 仪器

    植物DNA提取试剂盒(北京博迈德生物有限公司，批号:69691125)、TProfessiona型PCR扩增仪(德国 Biometra公司 ......