祝日荣 任小巧 毛 萌 王明强 郭慧娟 仁青加 葛东宇 李根茂 郑丽娟

    论 著

    藏医白脉疗法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及对海马齿状回Jagged1表达的影响

    祝日荣任小巧毛萌王明强郭慧娟仁青加葛东宇李根茂郑丽娟

    目的 探讨白脉疗法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑损伤的保护作用及对海马齿状回Jagged1表达的影响。方法 线栓法制作局灶性脑缺血再灌注大鼠模型。随机分为假手术组、模型组、白脉疗法组，脑缺血1.5小时，分别再灌注7天、14天，通过氯化三苯基四氮唑(triphenyltetrazolium chloride，TTC)染色观察脑梗死面积，苏木精-伊红染色法 (hematoxylin-eosin staining，HE)染色观察皮层细胞形态变化，并应用免疫组化法检测各组大鼠海马齿状回Jagged1阳性细胞数量。结果 (1)TTC染色观察到正常脑组织呈鲜红色，梗死区脑组织呈苍白色，并且随着再灌注时间的延长可见梗死区扩大，白脉疗法组的脑梗死体积小于模型组，且14天时与模型组比较有显著性差异(P1 材料与方法

    1.1实验动物

    健康雄性SPF级SD大鼠60只，体质量(250±10)g，购买于北京斯贝福实验动物技术有限公司，许可证号为：SCXK(京)2011-0004。

    1.2药物、试剂及仪器

    如意珍宝丸(生产批号：20150116)，购自金科藏药股份有限公司；白脉软膏(生产批号：130826)，购自西藏奇正藏药股份有限公司；大鼠A级MCAO栓线，购自北京西浓生物技术有限公司；TTC(Genebio)、Rabbit Anti-Jagged1多克隆抗体(Santa Cruz Biotechnology)、浓缩型DAB试剂盒、抗兔超敏二步法免疫组化检测试剂，均购自北京中杉金桥生物公司。

    1516型切片机，购自德国Leitz公司；BX40型光学显微镜、E320型显微照相机，购自日本Olympus公司；电热恒温培养箱(DH4000 AB型)，购自天津市泰斯特仪器有限公司。

    1.3局灶性脑缺血再灌注模型制备

    参照Belayev[7]报道的线栓法加以改良后建立左侧大脑中动脉栓塞缺血模型(middle cerebral artery occlusion，MCAO)。手术前1天禁食，自由饮水。将SD大鼠腹腔注射10%水合氯醛溶液(3.5 mL/kg)麻醉后，于颈正中线处纵向切开皮肤，分离右侧颈总动脉(common carotid artery，CCA) ......