基于蛋白组学探讨羟基红花黄色素A对急性肝损伤的作用机制
1材料和方法,1实验动物,2实验主要仪器,药物与试剂,3动物分组,造模与给药,4检测指标,5蛋白组学分析,6统计学分析,2结果,1羟基红花黄色素A对ALI大鼠肝脏系数以及生化指标的影响,2羟基红花黄色素A
侯祥梅 张子英 马月宏 金蓉 乙兵 杨冬冬 马丽杰急性肝损伤(acute liver injury,ALI)是一种以急性肝细胞坏死为特征的严重急性疾病[1],诱导ALI的因素包括病毒感染、创伤、乙醇和各种有毒物质等[2],如果没有得到有效的治疗,严重或连续的肝损伤将会导致肝纤维化、肝硬化,甚至发展为肝癌[3]。肝损伤的防治是肝病临床治疗的重要步骤。
羟基红花黄色素A(Hydroxysafflor yellow A,HSYA)是从中药红花中提取的一种水溶性成分[4],具有抗炎、抗氧化、抗凋亡和保护神经等多种药理作用[5-6],已被证明是心血管疾病、癌症和糖尿病的有效治疗剂[7]。最近,有研究发现羟基红花黄色素A对多种肝病具有保护作用,可以通过减弱炎症条件下的巨噬细胞活化减轻肝损伤[8];通过抑制氧化应激减轻肝纤维化[9],通过抑制p38 MAPK磷酸化抑制肝细胞癌的血管生成[10]。然而,关于羟基红花黄色素A保护ALI的确切机制,目前还缺乏系统的研究。为进一步探讨羟基红花黄色素A在ALI中的作用,本研究拟利用蛋白组学的方法,对羟基红花黄色素A作用于ALI的多靶点、多通路等进行研究。
1 材料和方法
1.1 实验动物
SPF级Wistar雄性大鼠50只,体质量180~220 g,购自斯贝福(北京)生物技术有限公司,许可证号:SCXK(京)2019-0010。所有动物均饲养于内蒙古医科大学实验动物中心,室温18~22℃。大鼠自由进食、饮水,适应性饲养5天后进行后续实验。动物实验经内蒙古医科大学医学伦理学委员会批准(批准文号:YKD202001020)。
1.2 实验主要仪器、药物与试剂
高速台式冷冻离心机,Thermo Scientific公司;超纯水装置,Millipore公司;快速组织细胞破碎仪,上海净信有限公司;生物组织包埋机、烘片机、摊片机,浙江科迪仪器设备有限公司;轮转切片机、智能荧光正置显微镜,美国Leica公司。
羟基红花黄色素A,成都植标化纯生物技术有限公司,批号:PCS-210608;丙氨酸转氨酶(alanine transaminase, ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase, AST)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)检测试剂盒,BIOBASE公司,批号分别为:10323011H、10427010H、10318008H;超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)检测试剂盒 ......
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