张月颖 张珊 温志歌 史佩玉 王皓朔 倪青

    胰岛β细胞功能受损是2型糖尿病发生发展的中心环节,故保护和恢复胰岛β细胞功能是改善和治疗2型糖尿病的重要策略。近年来研究者认为胰岛内分泌细胞间命运转换是导致糖尿病胰岛功能下降的重要原因[1-2],胰岛β细胞“去分化”的发现拓展了β细胞功能损伤的机制范围,去分化即β细胞在应激状态下退化成具有多分化潜能的前体细胞,丧失部分或全部胰岛素分泌的能力,当应激环境解除后,其可再分化为具有正常分泌功能的β细胞,此过程与遗传基因和后天环境因素有关[3-4]。既往研究证实,补肾法在糖尿病治疗中可以起到降血糖、保护胰岛细胞功能作用[5-7]。金匮肾气丸出自经书《金匮要略》,功用补肾填精,助阳化气,本研究中药肾气丸加减方以金匮肾气丸为基础方加减化裁,去炮附子以防止其辛热伤津,加黄芪、党参健脾益气,气津双补,胡芦巴温肾阳助气化和马齿苋清热利湿以应标本兼顾治则。

    胰岛β细胞去分化机制为β细胞功能富集基因的下调,其中比较关键的两个基因为胰腺十二指肠同源盒基因(pancreatic duodenal homeobox-1,PDX-1)和肌腱膜纤维肉瘤癌基因同系物 A(v-maf musculoaponeurotic fibrosarcoma oncogene homologue A,MafA),PDX-1是胰腺发育成熟过程中重要转录因子,对β细胞增殖和胰岛素分泌功能起重要作用[8-9],MafA特异存在于胰岛β细胞,与PDX-1共同促进胰岛素基因表达,是胰岛β细胞分化过程中重要激活因子[10-11],PDX-1和MafA可作为量化β细胞再生和功能“再恢复”的标志物[12],其稳定性受糖原合成酶激酶-3β (glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)的影响。GSK-3β是一种多功能丝氨酸/苏氨酸激酶,在能量代谢、细胞生长和凋亡中起重要作用[13],GSK-3β可调节胰岛β细胞中PDX-1的稳定性,其过度激活可导致胰岛β细胞增殖减少和功能下降[14-15]。在此基础上,本研究从β细胞凋亡角度基于磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸—苏氨酸激酶/糖原合成激酶3β(phosphoinositide3-kinase/threonine-protein kinase/glycogen synthase kinase-3,PI3K/Akt/GSK-3β)信号通路探究肾气丸加减方对高糖高脂作用下MIN6细胞功能影响及可能作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞

    小鼠胰岛β细胞(MIN6),购于上海雅吉生物科技有限公司,完成细胞及种属鉴定 ......