赵思雨 沈潜 付国兵 谢丹丹 李晶磊 李拓 赵峻嘹 齐恒 柏洁 耿楠

    多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是一种常见的女性生殖代谢内分泌紊乱疾病,主要临床表现为肥胖、月经紊乱、高雄激素血症、稀发排卵或无排卵、多毛、痤疮等,多发于生育期女性,发病率为6%～10%,是导致女性不孕的主要原因,会增加女性患心脑血管疾病、妇科疾病、2型糖尿病及远期并发症的风险,严重影响患者的生命质量、生育及远期健康。PCOS的发病机制尚不明确,因其临床表现及治疗疗效的高度异质性,目前对于该病的诊疗仍未达成共识,大多数医家认为本病由于下丘脑—垂体—卵巢轴功能出现紊乱导致。多囊卵巢综合征患者的一大特点是内分泌紊乱,有研究表明,PCOS患者有更高的血糖异常率[1],患糖尿病风险更高,性激素、胰岛素和血糖检测能够对多囊卵巢综合征的临床诊断提供非常重要的数据支持[2]。p38 丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)主要参与细胞的分裂与增殖,在磷酸化过程中可促进其他胞质蛋白磷酸化,p38 MAPK可能是PCOS卵巢多卵泡发育的基础,研究表明,PCOS卵巢粒细胞较于非PCOS卵巢粒细胞中,磷酸化丝裂原活化蛋白激酶p38(p-p38 mitogen-activated protein kinase,p-p38 MAPK)表达量高[3]。振腹法是作用于腹部神阙穴的一种特色手法,研究表明,振腹法可以改善大鼠卵巢形态结构,降低性激素、炎症因子表达水平,对PCOS大鼠有一定治疗作用[4]。基于以上前提,本研究应用振腹法对PCOS模型大鼠进行干预,探究振腹法治疗对PCOS大鼠血糖水平的调节作用,及振腹治疗对p38 MAPK蛋白表达与卵巢形态结构的影响,为振腹法治疗PCOS的临床应用提供基础研究依据,现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选择SPF级SD雌性大鼠40只,6周龄,体质量(180±20) g,性成熟,未交配,由北京维通利华实验动物技术有限公司提供,生产许可证编号[SCXK(京)20166-0006]。屏障环境下室内温度(23±1)℃,湿度(45±5)%,日光灯光照,普通清洁级鼠饲料饲养,自由饮用水。

    1.2 主要试剂及仪器

    实验试剂:来曲唑:0.25 mg/片×10片/盒(国药准字H19991001,江苏恒瑞医药股份有限公司),二甲双胍:0.5 g/片×20片/盒(国药准字H20023370,中美上海施宝贵制药有限公司),1%羧甲基纤维素钠溶液(Coolaber,批号:C9230),碱性美蓝染液(泰科美生物科技有限公司),0.01 mol/L磷酸缓冲盐(phosphate buffered saline, PBS),INS酶联免疫检测试剂盒(武汉云克隆有限公司,CEA448Ra),蛋白提取液(MDL,MDL91201),蛋白酶抑制剂(MDL,MD912893),BCA蛋白浓度测定kit(MDL,MD913053),SDS-PAGE预制胶套装kit(MDL,MD911919),中等蛋白分子量marker(Thermo,26617),p38(Bioss,bs-1640R),p-p38(Bioss,bs-5477R),二抗(MDL,MD932485),75%酒精,2%戊巴比妥钠 ......