余甜 杨小颀 马晓军 胥冰

    复发性流产(recurrent spontaneous abortion,RSA)在我国是指与同一性伴侣连续发生3次及以上的自然流产(流产发生于产妇孕28周前,且胎儿体重小于1 000 g)[1]。RSA病因复杂,且有半数以上的患者病因不明[2]。辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)所分泌的白细胞介素17A(interleukin-17A,IL-17A)和调节性T细胞(regulatorycells,Treg)分泌的转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)共同参与调节母胎界面免疫耐受状态的形成和维护[3],是RAS免疫致病因素中的重要影响因果。中药白术可影响体内免疫调节[4-6],中医学认为血气足以养胎,而脾为气血生化之源,中药白术为健脾良药[7]。故笔者从中医学角度推测白术可能通过健脾固摄、疗养气血安胎,并通过免疫学方法观察RSA模型小鼠母胎界面的免疫状态,深入研究白术对异常妊娠免疫的恢复和维持作用,从而佐证中药白术“健脾安胎”的理论。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    选取40只处于8周龄的清洁级CBA/J雌性小鼠、16只DBA/2雄性小鼠和4只BALB/C雄性小鼠作为实验模型动物,三种小鼠均购于南京卡文斯生物技术有限公司(由上海市计划生育科学研究所实验动物经营部培育出售)。许可证号码:SCXK(沪)2018-0006。

    1.2 主要药品及试剂

    中药白术提取物购自西安德生元,7∶1水提;IL-17A及TGF-β1 ELISA试剂盒(上海艾莱萨,批号:EIA-2223;EIA-2747);兔抗小鼠CD4及大鼠抗小鼠FOXP3(Servicebio,批号:GB13064-2;GB13445);兔抗小鼠RORγt(Bioss,批号:BS-23110R)。

    1.3 动物建模及分组给药

    雌性CBA/J与雄性DBA/2小鼠按照2∶1比例合笼为复发性流产模型;雌性CBA/J与雄性BALB/C小鼠按照2∶1比例合笼为正常妊娠模型。10～12小时后检查,见阴道栓的CBA/J则直接判定为成功怀孕,未见阴道栓者取阴道分泌物进行染色镜检,见精子者与前者同判定为孕0天。后将受孕小鼠分为正常妊娠组、流产模型组及白术低剂量组、白术中剂量组、白术高剂量组,每组8只 ......