刘智勇,翁小琴,薛倩倩,陈惠云

    胶质瘤是一种多见的颅内恶性实体肿瘤,患者的血管密度会严重影响该病的严重程度、肿瘤恶性程度及预后[1-2],因此,临床治疗常以抗肿瘤血管生成为关键点,故多选用肿瘤血管抑制剂抑制血管内皮细胞增殖[3]。雷公藤红素取自卫矛科植物雷公藤的全株或去皮木质部,是雷公藤的主要活性成分之一,具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用[4]。本研究旨在探讨雷公藤红素对血管内皮细胞株体外增殖的抑制作用,现报道如下。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 以血管内皮细胞株ECV304为实验标本,分别使用低浓度、高浓度的雷公藤红素作用于血管内皮细胞株ECV304。

    1.2 试剂与仪器 血管内皮细胞株ECV304购于American Type Culture Collection,RPMI 1640培养基购于GIBCO BRL公司,小牛血清购于上海实生公司;雷公藤红素购于成都普思(PS0048-0020),纯度>98%;二甲基亚砜(DMSO)购于Sigma公司,溴化丙啶购于法国Genetech公司。流式细胞仪购于Coulter公司,型号为Epics XL型。

    1.3 观察指标与实验方法 将不同浓度雷公藤红素作用于血管内皮细胞株ECV304中,通过绘制生长曲线、HE染色、流式细胞仪观察细胞生长曲线、细胞形态、内皮细胞周期及细胞凋亡情况。

    1.3.1 不同浓度雷公藤红素作用下的内皮细胞生长情况:使用DMSO对雷公藤红素进行助溶,而后使用RPMI 1640培养基将其稀释至实验所需浓度,DMSO最终浓度需低于0.1%;取出血管内皮细胞株,于24孔板中以1×104/孔进行接种,分别加入5、10、15、20 μg/ml 4种浓度的雷公藤红素,并以0.1% DMSO为阴性对照组 ......