[关键词] ELISA；检验；因素

    由于酶联免疫吸附试验(ELISA)以灵敏度较高、，特异性强不需要特殊设备，所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定[1]，但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大，一般涉及到样本的收集保存、试剂准备、加样、温育、洗板、显色、比色、结果判断和结果报告等方面，其中任一步骤的不当都会影响测定结果，尤以加样、温育和洗板步骤为甚，只有避免了这些因素才能保证实验结果的准确性和可靠性[2]。我将各个环节应注意的问题总结于下，以期给同行带来一些启发，提高试验质量。

    1 样本的收集保存

    疾病预防控制系统用于ELISA测定的样本最常用的是血清(浆)，在处理和保存样本方面要考虑以下几个方面：①要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素集团，有类似过氧化物的活性，因此，在以HRP为标记酶的ELISA测定中，如血清样本中血红蛋白浓度较高，则很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的HRP底物反应显色；②血液标本存放足够的时间，使纤维蛋白充分析出。最好离心后使用。必要时可置37℃，2h促进凝集 ......