正交优选表面活性剂提取山楂黄酮的工艺研究(1)
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2011年2月15日
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[摘要] 目的：优选用表面活性剂提取山楂中黄酮的最佳工艺条件。方法：以总黄酮含量为指标，采用单因素试验和正交试验确定最佳提取工艺。结果：山楂中黄酮的最佳提取工艺条件为，采用质量分数为1.5%的吐温80水溶液，在90℃提取1 h，提取2次，料液比为1∶20，提取率为4.55%，比传统的乙醇回流提取山楂黄酮的提取率增加了16.97%。结论：该法以溶有少量表面活性剂的水替代高浓度的醇进行活性成分的提取，能大大降低提取成本，并提高提取率，是较理想的一种提取新工艺。
[关键词] 表面活性剂；山楂；黄酮；正交试验
[中图分类号] R283 [文献标识码] B [文章编号] 1674-4721(2011)02(b)-136-03
Optimum flavonoids extraction from hawthorn fruits with surfactant
PAN Fangfang, GAO Jia, CHEN Jing
(College of Bioengineering, Zhejiang Chinese Medical University, Hangzhou 310053, China)
[Abstract] Objective: To optimum extraction technology of flavonoids from hawthorn fruits with surfactant. Methods: Single factor and orthogonal test were used to study the extraction conditions to extract flavonoids from hawthorn fruits. Results: The optimum extracting condition of extracting flavones from hawthorn was showed as follows, mass fraction of Tween 80 solution 1.5%; temperature of estraction 90℃; time of extraction 1 h; twice and the solid- liquid ratio 1∶40 (g/ml). Conclusion: The method is low cost, high yeild and no need for organic solvent and can be applied multipurposely.
[Key words] Surfactan; Hawthorn; Flavones; Orthogonal test
山楂为蔷薇科植物山楂(Crataegus Pinnatifida Bunge)、山里红(Crataegus pinnatifida Bunge vat.Major N.E.Br.)及野山楂(Crataegus cuneata Sieb et Zucc.)的干燥成熟果实。山楂性酸、甘、味温，归脾、胃、肝经，具有消食化积、活血化瘀的功效。山楂含有丰富的黄酮类化合物，对心脑血管疾病有显著疗效，具有降血脂、抗心肌缺血及再灌注损伤、增加冠状动脉流量等作用[1]。
山楂黄酮的提取主要有有机溶剂浸提、微波辅助提取[2]、超声波辅助提取[3]和超临界萃取等。而表面活性剂具有双亲结构，能降低表面张力，增强溶剂对物料的润湿性和渗透性，且对天然产物的有效成分具有增溶作用，从而增加浸出效能和萃取率，目前在天然产物提取中得到较多的应用[4-5]。目前，尚无使用表面活性剂辅助提取山楂黄酮的相关报道。故本实验利用表面活性剂的增溶作用，以溶有少量表面活性剂的水替代高浓度的醇或其他有机溶剂进行活性成分的提取，能大大降低提取成本，并提高提取率，为山楂资源的深度开发利用提供技术支持。
1 材料与仪器
1.1 药物与试剂
山楂，经浙江中医药大学生药教研室姚振生教授鉴定为Crataegus Pinnatifida Bunge的干燥成熟果实；吐温80(Tween-80)温州清明化工有限公司；平平加(Peregal)上海文华化工颜料公司；聚乙二醇(PEG)上海文华化工颜料公司；烷基糖苷(APG)北京信诺久恒料贸有限公司；椰子油脂肪酸二乙醇酰胺(CDEA)北京信诺久恒料贸有限公司；其他试剂均为分析纯。
1.2 仪器
电子天平[SPS402F型，梅特勒-拖利多(常州)称重设备系统有限公司制造]；TU-1900双光束紫外可见分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
2 方法与结果
2.1 提取工艺流程
准确称取山楂粉末5 g，加入一定质量分数的表面活性剂水溶液进行回流提取，合并浸提液，浓缩得黄酮提取液。
2.2 标准曲线的制备
准确称量芦丁标准品0.003 8 g，加60%乙醇溶解并定容至50 ml。精密量取标准储备液0、1、2、3、4 ml，分别置于10 ml刻度管中，加5%亚硝酸钠溶液0.5 ml，放置5 min，加10%硝酸铝溶液0.5 ml，摇匀后放置6 min，加1 mol/L氢氧化钠溶液4 ml，再加60%乙醇定容至10 ml，以相应试剂为空白，在508 nm波长处测定吸光度 ......
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