caspase-8在卡铂诱导人食管鳞癌细胞凋亡中的作用研究
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[摘要] 目的：探讨caspase-8在卡铂诱导人食管鳞癌细胞凋亡中的作用。方法：流式细胞术分别检测对照组及经卡铂处理的实验组人食管鳞癌细胞株Eca-109、TE-1、TE-10的凋亡率，同时采用RT-PCR及western blotting检测各组细胞表达caspase-8 mRNA及蛋白的变化情况。结果：用终浓度40 μg/ml的卡铂可诱导人食管鳞癌细胞株Eca-109、TE-1、TE-10凋亡，同时发现经卡铂处理组Eca-109、TE-1、TE-10细胞表达caspase-8 mRNA及蛋白水平均呈显著升高趋势。结论：卡铂可增加caspase-8在食管鳞癌细胞中的表达，从而诱导人食管鳞癌细胞凋亡，这可能是卡铂治疗食管鳞癌的分子机制之一。
[关键词] 食管癌；卡铂；caspase-8；凋亡
[中图分类号] R735.1 [文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2011)07(b)-011-03
Role of caspase-8 in apoptosis of esophageal squamous cell carcinoma induced by carboplatin
YANG Yubai, WANG Hongmei*
Department of Surgery, The Cangxi Pepole′s Hospital in Guangyuan City, Sichuan Province, Cangxi 628400, China
[Abstract] Objective: To observe the role of caspase-8 expression in apoptosis of esophageal squamous cell carcinoma induce by carboplatin. Methods: The apoptosis rates and mRNA expression levels of caspase-8 were detected in TE-1 cells, TE-10 cells and Eca-109 cells were treated by carboplatin with concentration 40 μg/ml. Results: Carboplatin induced apoptosis of TE-1 cells, TE-10 cells and Eca-109 cells, and caspase-8 mRNA and protein expression levels of TE-1 cells, TE-10 cells and Eca-109 cells were increase in experiment groups. Conclusion: Carboplatin induced TE-1 cells, TE-10 cells and Eca-109 cells apoptosis via changing mRNA expression levels of caspase-8.
[Key words] Esophageal carcinoma; Carboplatin; caspase-8; Apoptosis
食管癌是常见消化道恶性肿瘤之一，其发病在我国具有明显的地域特点，在河北、河南、山西、陕西、湖北、四川等地的发病率高居各种肿瘤发病率的首位。食管鳞癌占食管恶性肿瘤的95%以上，对食管鳞癌发病机制及治疗方法的研究具有非常重要的意义。目前食管癌的治疗手段仍以包括手术、化疗、放疗等在内的综合治疗为主，远期疗效仍不够理想[1-2]。近年来由于肿瘤医学的不断发展，新的抗肿瘤药物不断应用于临床，给食管鳞癌的治疗带来一些新的机会。
卡铂是近年来备受重视的第二代铂类化合物，因其肾毒性、耳毒性、神经毒性及胃肠道反应等明显低于顺铂，常用于实体瘤如小细胞肺癌、恶性淋巴瘤、睾丸肿瘤、卵巢癌及头颈部癌等的化疗中[3-5]。已有研究[6]表明卡铂有抑制食管癌细胞生长、诱导肿瘤细胞凋亡的作用；采用卡铂联合紫杉醇等药物治疗食管癌的临床研究[7-8]结果也表明，卡铂不仅可以提高食管癌治疗的总有效率，而且毒副作用无明显增加，患者耐受性较好，这表明卡铂在食管癌的临床化疗中具有非常高的应用价值。
caspase-8是半胱氨酸蛋白酶超家族中的一员，在Fas/FasL介导的细胞凋亡途径中具有非常重要的作用[9]。已有研究表明caspase-8表达水平与食管癌的发生、发展及转移有密切关系[10-11]。笔者采用卡铂诱导人食管鳞癌细胞株Eca-109、TE-1、TE-10凋亡，并检测这3种细胞表达caspase-8的变化情况，深入研究caspase-8在卡铂诱导人食管癌细胞凋亡过程中的作用机制，为临床应用提供实验依据。
1材料与方法
1.1材料
卡铂注射液购于齐鲁制药厂；RPMI1640培养液、0.05%的胰蛋白酶及胎牛血清购于Hyclone；Annexin-V(FITC)/ PI凋亡检测试剂盒购于杭州隆基生物工程研究所；总RNA提取试剂盒及两步法RT-PCR试剂盒购于GENEAID公司；蛋白提取液为Pierce公司产品 ......
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