肠球菌耐药性分析
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[摘要] 目的 分析本地区肠球菌的耐药情况和临床分布特点，以便了解其感染状况，指导临床合理使用抗菌药物并防止其导致的医院内感染的流行。 方法 收集2009年10月～2011年9月在本院分离的各类患者的非重复菌株，采用药敏纸片扩散法(κ-B法)，对实验菌株进行药敏实验。 结果 肠球菌对替考拉宁(TEC)全部敏感，对呋喃妥因较为敏感，敏感率为91.25%～95.83%，对红霉素(ERY)的耐药率为82.4%～96.3%；对四环素(TET)耐药率为70.3%～73.2%；对氨芐西林(AMP)和青霉素(PEN)耐药比较接近，为23.5%～30%；对抗生素的耐药率的分析结果显示，除氯霉素(CHL)外，屎肠球菌明显高于粪肠球菌。 结论 肠球菌属因存在种间的差异，抗生素耐药性也有所不同，同时，肠球菌的耐药性也比较严重，应引起高度重视。
[关键词] 肠球菌；基因型；纸片扩散法；耐药性
[中图分类号] R446.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2012)03(c)-0079-02
肠球菌是广泛存在于人和动物消化道及自然界中的一种条件致病菌。既往认为是一种对人类健康无害的革兰氏阳性球菌。二十世纪八十年代以来，由于临床中抗生素的广泛使用及免疫抑制剂的大应使用等因素的影响，导致肠球菌感染不断增加，并且由于肠球菌的固有耐药和获得性耐药，从临床分离的标本中耐药性的增加，出现多重耐药，使许多常用抗菌药物在治疗肠球菌感染时失败[1-2]。因此，对肠球菌的药物敏感性研究也引起越来越多的科学家的重视。为了给临床治疗提供帮助，选择2009年10月～2011年9月本院分离到的200株肠球菌菌株进行体外抗菌活性检测并加以分析。现报道如下：
1 资料与方法
1.1 菌株来源
选择2009年10月～2011年9月从本院各科室送检的的标本中分离非重复肠球菌菌株200株，其中，住院患者146株，门诊患者54株。主要来源的标本来自尿液115株来自尿液，占57.5%，皮肤软组织创面分泌物及外科切口分泌物70株，占35%，血液10株，腹腔、胸腔引流液及胸腹腔积液5株。所有菌株经常规生化试验鉴定。
1.2 培养基及抗菌药敏
药敏用水解酪蛋白培养基和抗生素纸片均购于北京天坛生物技术开发公司。
1.3 药敏纸片
抗生素药敏纸片如下：氨苄西林(AMP)、万古霉素(VA)、青霉素(PEN)、环丙沙星(CIP)、氯霉素(CHL)、左氧氟沙星(LvF)、呋喃妥因(FT)、红霉素(ERY)、四环素(TE)、替考拉宁(TEC)、高含量庆大霉素(GEH)、高含量链霉素(STH)等12种。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923和粪肠球菌ATCC 29212。
1.4 方法
采用药敏纸片扩散法(κ-B法)，药敏试验操作及结果解释均参照2002年版美国临床实验室标准化委员会文件。氨基糖苷类高水平耐药(HLAR)肠球菌的简单用含120 μg/片的庆大霉素和300 μg/片的链霉素药敏纸片对实验菌株进行药敏实验，若抑菌环直径≥10 mm时视为敏感株，抑菌环直径≤6 mm时视为HLAR[3-4]。
2 结果
2.1 菌株分布
2009年10月～2011年9月共收集肠球菌200株，其中粪肠球菌120株(60%)，屎肠球菌80株(40%)。肠球菌感染以粪肠球菌为主，其次为屎肠球菌，但粪肠球菌所占比例略高。
2.2 HLAR药敏试验
本研究只对100株粪肠球菌株和50株屎肠球菌株进行了HLAR筛选。对高浓度的庆大霉素敏感的分别有62株(62%)和23株(46%)，对高浓度链霉素敏感的分别有30株(30%)和28株(56%)，见表1。
2.3 肠球菌对常用抗生素的耐药性分析
肠球菌对TEC全部敏感，尽管未出现VA耐药株，但出现了1株VA耐药中介株；对呋喃妥因较为敏感，敏感率为91.25%～95.83%，对ERY的耐药比较高，敏感率为3.75%～18.33%；对AMP和PEN耐药比较接近，为23.5%～30%；除CHL外，屎肠球菌对抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌；但屎肠球菌对CHL的耐药率26.25%左右，而对粪肠球菌的耐药率为47.5%，粪肠球菌的耐药率明显高于屎肠球菌(表1)。这说明肠球菌属因存在种间的差异，耐药性也有所不同。
3 讨论
肠球菌属于肠球菌属，进几十年来已经成为医院内感染的重要病原菌。其感染率仅次于葡萄球菌。肠球菌由于细胞壁厚，对多种抗菌药物具有固有耐药。近年来，随着抗生素的不合理使用和免疫抑制剂的广泛应用，致使肠球菌感染不断增加，肠球菌为条件致病菌，主要引起菌血症、心内膜炎、泌尿系、腹腔、伤口等严重感染[5-6]。本资料显示，200株菌株中90%以上的样本来源于尿液和皮肤组织分泌物，可见肠球菌感染以尿路和皮肤创面感染为主，并能引起一定比例的菌血症。
本研究收集分离的200株肠球菌株中，没有分离出万古霉素的耐药肠球菌株，但却分离出1株耐万古霉素中介株。若盲目使用其他抗生素，不仅会延误患者治疗效果而且易造成耐药基因在细菌间传播、耐药菌株在医院内扩散。因此，我们必须严格掌握万古霉素的用药标准，避免抗生素的滥用，以减少耐万古霉素的肠球菌的发生和耐药基因的传播。
表1中肠球菌对12种抗生素的药敏结果显示，肠球菌对万古霉素、替考拉宁高度敏感，敏感率为100%，未发现耐药株；对呋喃妥因较为敏感，敏感率在91.25%～95.83%，粪肠球菌对青霉素仍多数敏感，敏感率在70%以上，对高浓度的庆大霉素的敏感率低于50%，说明两者联合应用时产生协同抗菌作用较少。对氯霉素的耐药率粪肠球菌明显高于屎肠球菌。除万古霉素、替考拉宁、红霉素、氯霉素外，屎肠球菌对其他抗生素的耐药性明显高于粪肠球菌。由此可见，肠球菌属因为存在种间差异，耐药情况也存在差异。因此，微生物实验室应将肠球菌鉴定到种，以便临床医生合理选用抗生素[7-8]。
[参考文献]
[1] 马越，李景云.张新妹，等.2002年临床常见细菌耐药性监测[J].中华检验医学杂志 ......
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