Caspase-1在小鼠皮肤切创愈合过程中的规律性表达与损伤时间的关系研究(2)
1 材料与方法1.1 动物分组与模型的制备
健康成年昆明小鼠36只,雌雄不限,体重(30±3) g,随机平均分为3组,包括生前损伤组30只,死后损伤组3只,空白对照组3只。生前损伤组又分为10个亚组,根据于伤后0 h、1 h、3 h、6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、5 d、7 d将小鼠颈椎脱臼处死分组,每组3只。死后损伤组为死后1 h后造模。10%的水合氯醛麻醉小鼠,按剂量0.004 mg/g体重腹腔注射。背部脱毛剂脱毛处理。常规手术消毒,在背部中央做一纵行长1.5 cm皮肤全层切口,深达筋膜。创面自然止血,不包扎不施药。切创后给予消毒饲料和双蒸水,保持伤口干燥,防止伤口感染。取伤口处及周边皮肤组织1.0 cm×1.5 cm,空白对照组小鼠不做切口处理,处死后取与损伤组小鼠相同部位大小相等的皮肤组织作为对照。死后损伤组小鼠处死后1 h造创,随后取皮肤组织。
1.2 主要试剂
两步法免疫组化检测试剂盒-SV系列(武汉博士德生物工程有限公司);DAB显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);兔抗小鼠caspase-1多克隆抗体(BA0586)(武汉博士德生物工程有限公司);聚合HRP标记抗兔IgG二抗(武汉博士德生物工程有限公司) ......
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