不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律研究(1)
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[摘要] 目的 研究不同采收期的芒果叶中总黄酮的变化规律。 方法 采用乙醇回流法从芒果叶中提取黄酮类物质，并用紫外分光光度法测定不同采收期芒果叶的总黄酮含量。 结果 芒果叶中总黄酮的含量随采收季节不同呈一定幅度变化，其中以1、11月总黄酮含量最高，5～7月含量较低。 结论 不同采收期是影响芒果叶中总黄酮质量的重要因素。
[关键词] 不同采收期；芒果叶；紫外分光光度法；总黄酮
[中图分类号] R927.2 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)02(c)-0074-02
芒果叶为漆树科植物芒果(Mangifera indica L.)的叶。芒果叶味酸、甘，性凉、平，具有平喘、止咳、祛痰、抗炎、镇痛、保肝利胆、抗脂质过氧化、抗病毒、抗肿瘤、抗菌等作用，对中枢神经系统和心血管系统等疾病也都有明显疗效[1-2]。芒果叶主要有效成分为黄酮类成分[3-4]，有关黄酮类成分的提取报道已有文献报导[5]，本文报道了不同采收期芒果叶中总黄酮变化规律，为深入研究开发芒果叶中总黄酮成分提供科学依据。
1 仪器与试药
1.1 仪器
UV-1800紫外-可见分光光度仪(上海美谱达仪器厂)；AG285电子分析天平(瑞士METTLER公司)。
1.2 试药
芒果叶采摘于广东省东莞市芒果种植园，经广东医学院药学院闫冲博士鉴定。采摘后于50℃烘箱干燥备用，每周采摘1次，持续1年。芦丁标准品购自南京替斯艾么中药研究所(批号：TCM027-091210)；乙醇等试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密称取干燥芦丁对照品13.40 mg，用50%乙醇定容至100 mL，精密吸取此溶液并用50%乙醇分别稀释成0.080 4、0.026 8 g/L的芦丁对照品溶液，备用。
2.2 供试品溶液的制备
精密称取不同采收期芒果叶各0.5 g，揉碎，用100 mL50%乙醇80℃回流3 h，冷却过滤，即得供试品溶液[6]。
2.3 标准曲线的绘制
准确吸取0.026 8 g/L的芦丁对照溶液1.00、2.00 mL，0.080 4 g/L的对照液1.00、2.00、3.00、4.00 mL分别置于10 mL容量瓶中，准确吸取0.134 g/L的芦丁溶液2.00 mL，至10 mL容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.5 mL，摇匀，放置6 min后加入10%硝酸铝溶液0.5 mL，摇匀，放置6 min；再加入5%氢氧化钠溶液4 mL，分别用50%乙醇加至刻度，摇匀，放置15 min后，以空白试剂为对照调0，于紫外分光光度计510 nm处测定，结果显示其吸光度分别为：0、0.025、0.051、0.088、0.183、0.262、0.366、0.867，通过最少二乘法得回归方程Y = 0.092 1 X - 0.000 1[Y：浓度(g/L)；X：吸光度(A510 nm)]，R2 = 0.999 1，证明线性关系良好。
2.4 精密度试验
精密量取0.032 16 g/L的对照品溶液1 mL于10 mL容量瓶中，平行制备6份，按“2.3”项下操作步骤，加入亚硝酸钠、硝酸铝及氢氧化钠溶液，于紫外分光光度计510 nm处测定吸光度分别为0.366、0.366、0.366、0.367、0.366、0.366(RSD = 0.11%，n = 6)，表明精密度良好。
2.5 重复性试验
精密称取同一采收期(采摘于08年10月18日)的芒果叶6份(每份0.5 g)，揉碎，分别用100 mL 50%乙醇80℃回流3 h，冷却过滤。精密吸取滤液1 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，测定吸光度分别为0.442、0.397、0.432、0.430、0.450、0.408(RSD = 4.74%，n = 6)，表明重复性良好。
2.6 稳定性试验
精密吸取芒果叶0.5 g(采摘于08年10月18日)提取液1 mL于10 mL容量瓶中，按“2.3”操作步骤，于紫外分光光度计510 nm处每10分钟测定吸光度1次，结果分别为：0.397、0.397、0.398、0.397、0.396、0.396、0.396。表明样品在60 min内稳定，RSD = 0.19%(n = 7)。
2.7 回收率试验
精密吸取芒果叶(采摘于09年2月21日，总黄酮含量为9.31%)提取液0.50 mL共9份，分别加入芦丁对照品适量(0.18、0.23、0.28 mg)各3份，按“2.3”项下操作步骤，于紫外分光光度计510 nm处测定吸光度分别为0.466、0.467、0.466、0.526、0.526、0.528、0.589、0.591、0.59，计算回收率，平均加样回收率为109.30%，RSD = 0.84%(n = 9)。
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