氯化血红素对大鼠肺微血管内皮细胞氧化损伤的保护作用
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2013年8月25日
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宗俊青 马捷 山西医科大学;山西医科大学第二医院心胸外科;
【摘要】目的探讨氯化血红素(hemin)对过氧化氢(H2O2)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs)氧化应激损伤的保护作用。方法①应用SD雄性大鼠的肺组织,进行大鼠PMVECs的原代培养并传代培养;通过倒置显微镜观察其形态,Ⅷ因子相关抗原免疫荧光鉴定。②应用H2O2构建PMVECs氧化应激损伤模型,并用hemin与H2O2共同孵育PMVECs。③采用MTT比色法检测各组细胞活力变化,用比色法检测内皮细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,Western-blot检测各组内皮细胞微管相关蛋白1轻链3(LC-3)含量。结果①体外培养的大鼠PMVECs呈梭形或多角形,形成单层后呈典型的鹅卵石样或铺路石样排列,免疫荧光检测FITC标记的Ⅷ相关抗体呈阳性,阳性率90%以上,成功建立了PMVECs的原代培养方法;②H2O2使内皮细胞活力下降,且呈剂量依赖性,200μmol/LH2O2内皮细胞活力下降50%左右;③H2O2组LDH含量均高于hemin组及正常对照组(P0.05),hemin组LC-3的表达显著低于H2O2组。结论低浓度hemin对H2O2诱导的PMVECs氧化应激损伤有保护作用,这种作用可能与hemin抑制H2O2诱导内皮细胞过度自噬有关。
【关键词】 氯化血红素 肺微血管内皮细胞 过氧化氢 自噬
【分类号】R363
肺损伤常发生在体外循环、心肺联合移植、肺切除、肺栓塞、复张性肺水肿、休克及心肺复苏等多种临床情况下。在各种原因引起的肺损伤中,肺微血管内皮细胞(pulmonarymicrovascular endothelial cells,PMVECs)是活性氧类的重要靶细胞之一。PMVECs构成半选择性屏障,该屏障对于肺
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