RNA干扰致FRAT1基因沉默结肠癌HT29细胞模型的建立(3)
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图4 FRAT1mRNA在四组细胞中的表达
A.normal colon cell;B.CTF182-1-1;C.CTF182-N-1;D.CTF182pSINsi-hu6
为了进一步检测FRAT1基因沉默效果,从未转染细胞、转染无功能siRNA的细胞、转染pSINsi-hu6-FRAT1表达载体的细胞及转染pSINsi-hu6载体的细胞中提取细胞裂解液。蛋白定量后,进行Western blot检测,结果显示,与未转染细胞组相比,转染pSINsi-hu6-FRAT1表达载体的细胞的FRAT1 蛋白表达量下降了55.72%(P<0.05),转染无功能siRNA的细胞及转染pSINsi-hu6载体的细胞组与未转染细胞组相比,FRAT1蛋白含量没明显变化(P值分别为0.4340、0.1824)(图5)。
图5 FRAT1蛋白在四组细胞中的表达
A.normal colon cell;B.CTF182-1-1;C.CTF182-N-1;D.CTF182pSINsi-hu6
3 讨论
结肠癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,发病率成逐年增高趋势,且病死率位居恶性肿瘤的第二位,进展后的结肠癌预后差是病死率高的主要原因[8]。当前,结肠癌治愈的主要手段是以手术为主的治疗方法。然而,手术费用高且副作用大,其中局部复发和远处的肝转移是手术失败的主要原因 ......
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