烟雾暴露对大鼠肺血管t-PA与PAI-1表达的影响(2)
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目前有关烟雾对内皮t-PA与PAI-1影响的研究,主要集中于血浆水平以及培养细胞方面,而烟雾对在体肺组织血管内皮细胞t-PA和PAI-1表达影响的研究尚少。本文通过制备烟雾暴露大鼠模型,观察肺血管内皮细胞中t-PA与PAI-1的表达水平,探讨烟雾暴露与戒烟对大鼠肺血管内皮纤溶平衡的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
SD雄性大鼠(山西医科大学实验动物中心)40只,8周龄,体重为(200±20) g,随机等分为5组:对照组(C组)、熏烟1个月组(S1组)、熏烟3个月组(S2组)、熏烟1个月戒烟1个月组(Q1组)、熏烟3个月戒烟1个月组(Q2组)。参照许建英等[10]相关研究的熏烟装置,装置由有机玻璃、不锈钢丝及角钢、玻璃板、空气泵、压力表、胶皮管等制成,熏烟箱(1 m×0.6 m×0.5 m)与吸烟小室(0.3 m×0.2 m×0.25 m)连接,测氧仪监测熏箱内氧浓度并使其保持于20%~21%。熏烟时将大鼠置于有机玻璃熏箱内被动吸烟,香烟烟雾有吸烟小室导入熏箱。香烟为太原市售猴王牌,每支含焦油12 mg,烟碱1.0 mg,一氧化碳15 mg。兔抗大鼠t-PA、PAI-1抗体购自北京博奥森公司,SABC盒购自武汉博士徳公司。
1.2 模型制备
C组:常规饲养,普通饲料,自由饮水,实验室温度(20±2)℃,湿度40%~70%,不作熏烟处理。S1组:常规饲养1周后,开始熏烟1个月。每周熏烟6 d,每天2次,两次间隔时间>4 h,每次15支,持续约1 h。S2组:常规饲养1周后,开始熏烟3个月,方法同S1组。Q1组:常规饲养1周后,开始熏烟,方法同S1组,1个月后停止熏烟,常规饲养1个月。Q2组:常规饲养1周后,开始熏烟,方法同S1组,3个月后停止熏烟,常规饲养1月。
1.3 肺组织标本制备
各组造模成功后,以20%乌拉坦400 ml/g腹腔注射麻醉,仰卧固定 ......
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