MMP-2\MMP-9及其抑制因子TIMP-2\TIMP-1联合检测对宫颈癌浸润转移潜能的预测价值(2)
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1.2 方法
1.2.1 主要试剂即用型鼠抗人MMP-2、MMP-9免疫组织化学试剂盒由北京中山生物制品有限公司提供;即用型鼠抗人TIMP-2、TIMP-1多克隆抗体由武汉博士德生物工程有限公司提供;HIGH-SABC试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供;DAB显色试剂盒由北京中山生物工程公司提供。
1.2.2 实验方法取ICC组和CIN组切除的病变组织标本1份;对照组任取宫颈组织1份。标本经10%中性甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋备用。厚度4 μm连续定向切片,处理后用于免疫组织化学染色和HE染色。免疫组织化学检测用SABC法,严格按照试剂盒说明书进行操作。用磷酸盐缓冲盐液(PBS)代替一抗作阴性对照,用已知的免疫组织化学染色阳性的宫颈切片(试剂公司提供)作阳性对照。结果判定[6]:采用双盲法,由两位医师独立观察每张切片后共同判断;阳性染色为细胞质或细胞膜出现棕黄色颗粒沉着。
1.2.3 参数记录和比较记录各个因子(MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2)的表达情况;比较各组相关因子的阳性表达率。同时记录ICC组患者年龄、FIGO分期、组织学分级、大体类型、组织类型、分化程度、脉管浸润和淋巴结转移等临床病理情况,分析临床病理参数与各因子阳性表达率的关系。
1.3 统计学方法
应用SPSS 13.0统计学软件进行数据分析,计量资料以x±s表示,采用t检验和方差分析,计数资料采用χ2检验,检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 3组相关因子阳性表达率的比较
ICC组MMP-2和MMP-9的阳性表达率显著高于CIN组和对照组,TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率显著低于CIN组和对照组(P<0.05);CIN组MMP-2和MMP-9的阳性表达率显著高于对照组,TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率显著低于对照组(P<0.05)(表1)。
表1 3组相关因子阳性表达率的比较[n(%)]
2.2 临床病理参数与相关因子阳性表达率的关系
ICC组中,Ⅱ期、G3级、低分化、有脉管浸润、有淋巴结转移的患者MMP-2和MMP-9的阳性表达率分别显著高于Ⅰ期、G1-G2级、中-高分化、无脉管浸润、无淋巴结转移的患者(P<0.05),而TIMP-2和TIMP-1的阳性表达率分别显著低于Ⅰ期、G1-G2级、中-高分化、无脉管浸润、无淋巴结转移的患者(P<0 ......
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