大鼠心室肌细胞急性酶分离及瞬时外向钾电流的记录
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2014年8月5日
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张良胜 李平 许翔 王莉 范忠才 河南省永城市人民医院心内科;泸州医学院附属医院心内科;
【摘要】目的探索成年SD大鼠心室肌细胞急性酶分离及记录瞬时外向钾电流的方法。方法以成年SD大鼠为研究对象,利用Langendorff灌流系统,利用Ⅱ型胶原酶二步灌流方法分离细胞,利用膜片钳技术记录大鼠心室肌瞬时外向钾电流。结果镜下可见存活心肌:呈杆状或矩形,表面干净,横纹清晰,立体感强,能记录出瞬时外向钾电流达3000 pA。结论本实验所用的方法细胞成活率高,能记录出瞬时外向钾电流。
【关键词】 心肌细胞 瞬时外向钾电流 膜片钳技术
【分类号】R541
成年大鼠心肌细胞的分离方法步骤比较复杂,条件要求很高,影响因素较多,不易获得高质量的心肌细胞,心肌细胞酶分离是难点,是膜片钳实验记录电流的基础。40多年来,酶解法被用于成年大鼠的心肌分离,到目前为止,尚无统一方法可循[1-2],本实验采用两步酶解法分离出较好形态的心肌细
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