白藜芦醇促TRAIL诱导PC—3细胞凋亡的作用(2)
2.2.2 caspase-8、caspase-3活性检测试剂盒结果 TRAIL蛋白组caspase-8、caspase-3活性升高，联合用药组升高更明显，与TRAIL蛋白组相比，差异有统计学意义(P<0.05)(表3)。
3 讨论
前列腺癌为常见的恶性肿瘤，且发病率逐年上升，特别对晚期的前列腺癌目前缺少有效的治疗方法，因而，寻求新的治疗手段是目前急需解决的问题。应用有效药物促进肿瘤细胞凋亡是目前治疗肿瘤的重要途径之一，也是前列腺癌治疗的关键靶点。
TRAIL通过与细胞表面的TRAIL受体特异性结合发挥促凋亡作用[10-11]，但有些肿瘤细胞TRAIL受体表达量较低而限制了TRAIL蛋白的促凋亡作用的发挥，因而寻找和应用能够提高TRAIL蛋白促凋亡作用的药物使之能够更好地发挥抗肿瘤作用[12]，成为抗肿瘤治疗新的突破点。
Res的生物学作用非常广泛，除具有强大的抗炎、抗氧化作用外，还对肿瘤的发生发展有明显的抑制作用[13-17]，但具体机制尚不清楚，且由于Res具有雌激素样活性，因而在前列腺癌的治疗中备受关注。已有研究结果表明，Res能够促进TRAIL蛋白对人肝癌细胞的凋亡作用[18]，因此，本研究通过实验证实Res是否对TRAIL蛋白诱导的人前列腺癌细胞凋亡具有促进作用。
实验结果显示，Res能够抑制PC-3细胞的增殖，且存在剂量依赖，当Res浓度为50 μmol/L时，作用较为明显，浓度继续增高，对细胞的增殖抑制作用不再增加，因而选用50 μmol/L为联合用药组Res的用药浓度。TRAIL蛋白组的实验结果表明，随着TRAIL蛋白浓度增高，PC-3细胞的增殖率降低，在TRAIL蛋白浓度达到100 ng/ml后，对细胞增殖的抑制作用不再提高，因而联合用药组的TRAIL蛋白浓度选用100 ng/ml。在TRAIL蛋白浓度相同的情况下，联合用药组的细胞增殖率明显低于TRAIL蛋白组，说明Res能够加强TRAIL蛋白对细胞的增殖抑制作用。流式细胞术的检测结果同样显示，Res能够显著提高TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用。由于TRAIL蛋白是通过与死亡受体结合，活化caspase-8，继而引发caspase级联反应，最后激活下游凋亡执行分子caspase-3而引发凋亡[19-20]。因此，本实验进一步检测了caspase-8和caspase-3的活性，结果显示，与单独应用TRAIL蛋白相比，联合用药组caspase-8和caspase-3的活性明显升高，进一步证实Res可以提高TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用，为前列腺癌的治疗提供了新的思路和实验基础。
[参考文献]
[1] Simons MP，Nauseef WM，Griffith TS，et al.Neutrophils and TRAIL：insights into BCG immunotherapy for bladder cancer[J].Immunol Res，2007，39(1-3)：79-93.
[2] Zoog SJ，Ma CY，Kaplan-Lefko PJ，et al.Measurement of conatumumab-induced apoptotic activity in tumors by fine needle aspirate sampling[J].Cytometry A，2010，77(9)：849-860.
[3] Sanlioglu AD，Karacay B，Koksal IT，et al.DcR2 (TRAIL-R4) siRNA and adenovirus delivery of TRAIL (Ad5hTRAIL) break down in vitro tumorigenic potential of prostate carcinoma cells[J].Cancer Gene Ther，2007，14(12)：976-984.
[4] Zhao J，Lu Y，Shen HM，et al.Targeting p53 as atherapeutic strategyin sensitizing TRAIL-induced apoptosis in carlcer cells[J].Cancer Lett，2012，314(1)：8-23.
[5] Morizot A，Merino D，Lalaoui N，et al.Chemotherapy overcomes TRAIL-R4-mediated TRAIL resistance at the DISC level[J].Cell Death Differ，2011，18(4)：700-711.
[6] 金松，辛国荣，孟繁石，等.白藜芦醇对人胃癌SGC7901细胞的抑制及其可能的机制[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2008，15(4)：365-368.
[7] 赵克森.白藜芦醇的生物学特性和效应[J].中国病理生理杂志，2012，28(9)：1709-1711.
[8] 胡凌云，王海钠，裴俊俊，等.白藜芦醇防癌抗癌作用及其分子机制研究进展[J].山东医药，2010，50(5)：111-112.
[9] Wight RD，Tull CA，Deel MW，et al.Resveratrol effects on astrocyte function：relevance to neurodegenerative diseases [J].Biochem Biophys Res Commun，2012，426(1)：112-115.
[10] Smith MR，Jin F，Joshi I.Bortezomib sensitizes non-Hod-gkin′s lymphoma cells to apoptosis induced by antibodies to tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) receptors TRAIL-R1 and TRAIL-R2[J].Clin Cancer Res，2007，13(18)：5528-5534. (李小翠 尤红娟 李向阳 华慧 汤仁仙)
3 讨论
前列腺癌为常见的恶性肿瘤，且发病率逐年上升，特别对晚期的前列腺癌目前缺少有效的治疗方法，因而，寻求新的治疗手段是目前急需解决的问题。应用有效药物促进肿瘤细胞凋亡是目前治疗肿瘤的重要途径之一，也是前列腺癌治疗的关键靶点。
TRAIL通过与细胞表面的TRAIL受体特异性结合发挥促凋亡作用[10-11]，但有些肿瘤细胞TRAIL受体表达量较低而限制了TRAIL蛋白的促凋亡作用的发挥，因而寻找和应用能够提高TRAIL蛋白促凋亡作用的药物使之能够更好地发挥抗肿瘤作用[12]，成为抗肿瘤治疗新的突破点。
Res的生物学作用非常广泛，除具有强大的抗炎、抗氧化作用外，还对肿瘤的发生发展有明显的抑制作用[13-17]，但具体机制尚不清楚，且由于Res具有雌激素样活性，因而在前列腺癌的治疗中备受关注。已有研究结果表明，Res能够促进TRAIL蛋白对人肝癌细胞的凋亡作用[18]，因此，本研究通过实验证实Res是否对TRAIL蛋白诱导的人前列腺癌细胞凋亡具有促进作用。
实验结果显示，Res能够抑制PC-3细胞的增殖，且存在剂量依赖，当Res浓度为50 μmol/L时，作用较为明显，浓度继续增高，对细胞的增殖抑制作用不再增加，因而选用50 μmol/L为联合用药组Res的用药浓度。TRAIL蛋白组的实验结果表明，随着TRAIL蛋白浓度增高，PC-3细胞的增殖率降低，在TRAIL蛋白浓度达到100 ng/ml后，对细胞增殖的抑制作用不再提高，因而联合用药组的TRAIL蛋白浓度选用100 ng/ml。在TRAIL蛋白浓度相同的情况下，联合用药组的细胞增殖率明显低于TRAIL蛋白组，说明Res能够加强TRAIL蛋白对细胞的增殖抑制作用。流式细胞术的检测结果同样显示，Res能够显著提高TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用。由于TRAIL蛋白是通过与死亡受体结合，活化caspase-8，继而引发caspase级联反应，最后激活下游凋亡执行分子caspase-3而引发凋亡[19-20]。因此，本实验进一步检测了caspase-8和caspase-3的活性，结果显示，与单独应用TRAIL蛋白相比，联合用药组caspase-8和caspase-3的活性明显升高，进一步证实Res可以提高TRAIL对PC-3细胞的凋亡作用，为前列腺癌的治疗提供了新的思路和实验基础。
[参考文献]
[1] Simons MP，Nauseef WM，Griffith TS，et al.Neutrophils and TRAIL：insights into BCG immunotherapy for bladder cancer[J].Immunol Res，2007，39(1-3)：79-93.
[2] Zoog SJ，Ma CY，Kaplan-Lefko PJ，et al.Measurement of conatumumab-induced apoptotic activity in tumors by fine needle aspirate sampling[J].Cytometry A，2010，77(9)：849-860.
[3] Sanlioglu AD，Karacay B，Koksal IT，et al.DcR2 (TRAIL-R4) siRNA and adenovirus delivery of TRAIL (Ad5hTRAIL) break down in vitro tumorigenic potential of prostate carcinoma cells[J].Cancer Gene Ther，2007，14(12)：976-984.
[4] Zhao J，Lu Y，Shen HM，et al.Targeting p53 as atherapeutic strategyin sensitizing TRAIL-induced apoptosis in carlcer cells[J].Cancer Lett，2012，314(1)：8-23.
[5] Morizot A，Merino D，Lalaoui N，et al.Chemotherapy overcomes TRAIL-R4-mediated TRAIL resistance at the DISC level[J].Cell Death Differ，2011，18(4)：700-711.
[6] 金松，辛国荣，孟繁石，等.白藜芦醇对人胃癌SGC7901细胞的抑制及其可能的机制[J].中国肿瘤生物治疗杂志，2008，15(4)：365-368.
[7] 赵克森.白藜芦醇的生物学特性和效应[J].中国病理生理杂志，2012，28(9)：1709-1711.
[8] 胡凌云，王海钠，裴俊俊，等.白藜芦醇防癌抗癌作用及其分子机制研究进展[J].山东医药，2010，50(5)：111-112.
[9] Wight RD，Tull CA，Deel MW，et al.Resveratrol effects on astrocyte function：relevance to neurodegenerative diseases [J].Biochem Biophys Res Commun，2012，426(1)：112-115.
[10] Smith MR，Jin F，Joshi I.Bortezomib sensitizes non-Hod-gkin′s lymphoma cells to apoptosis induced by antibodies to tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) receptors TRAIL-R1 and TRAIL-R2[J].Clin Cancer Res，2007，13(18)：5528-5534. (李小翠 尤红娟 李向阳 华慧 汤仁仙)