1.3 细胞的培养

    Vero细胞用10%胎牛血清的低糖DMEM培养基培养[7-8]，用胰蛋白酶+EDTA消化后，以0.5×105/ml的密度接种于24孔板中，每孔加入500 μl无抗生素培养基，细胞长到融合率为50%～60%时进行转染，取0.5、1.0、1.2、1.5 μl/孔的Lipofectanmine2000及1.0、1.5、2.0、2.5 μl/孔的FAM-siRNA，进行两两组合，每种组合种4个复孔。通过荧光显微镜下观察和流式细胞仪检测各种组合转染效率，以最优转染效率的组合浓度进行下一步转染。

    1.4 细胞的转染

    将siRNA转染试剂混合液加入含有细胞及不含血清的培养液，共6组siRNA(阳性对照组、阴性对照组、R1组920、R2组1405、R3组748、R4组1326)。同时设空白组，即不加转染试剂及siRNA，同等条件下加入不含血清的培养液。

    1.5 HSV-Ⅱ的接种

    转染过的Vero细胞，每孔接种100个量的TCID50/100 μl HSV-Ⅱ ......