Twist2、β—cadherin、E—cadherin在喉鳞状细胞癌中的表达及其相关性分析(2)
1.2 主要试剂
Twist2鼠单克隆抗体(Twist2 C1a:sc-81417,Santa Cruz Biotechnology Inc);β-cadherin、E-cadherin鼠单克隆抗体(ZM-0094,北京中衫金桥生物技术有限公司);鼠二抗免疫组化试剂盒(SP-9002,北京中衫金桥生物技术有限公司);DAB显色液(ZLI-9032,北京中杉金桥生物技术有限公司)。
1.3 方法
所选标本均制成石蜡标本,4 μm连续切片,一抗所选浓度Twist2、β-cadherin鼠单克隆抗体1∶100;E-cadherin鼠抗人单克隆抗体1∶50。采用免疫组织化学S-P法,严格遵守操作步骤进行实验。设置PBS代替一抗为阴性对照,作为质量控制标准,癌旁正常组织为正常对照组。
1.4 结果判定
Twist2在细胞质中阳性着色,阳性着色细胞会出现片状或颗粒状的胞质。结果采用半定量记分法判定[1],按阳性着色程度、阳性细胞所占比例分别评分,再用两者的乘积来判定结果:<4分为阴性表达,4~12分为阳性表达。
β-cadherin、E-cadherin在细胞膜上阳性着色 ......
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Twist2鼠单克隆抗体(Twist2 C1a:sc-81417,Santa Cruz Biotechnology Inc);β-cadherin、E-cadherin鼠单克隆抗体(ZM-0094,北京中衫金桥生物技术有限公司);鼠二抗免疫组化试剂盒(SP-9002,北京中衫金桥生物技术有限公司);DAB显色液(ZLI-9032,北京中杉金桥生物技术有限公司)。
1.3 方法
所选标本均制成石蜡标本,4 μm连续切片,一抗所选浓度Twist2、β-cadherin鼠单克隆抗体1∶100;E-cadherin鼠抗人单克隆抗体1∶50。采用免疫组织化学S-P法,严格遵守操作步骤进行实验。设置PBS代替一抗为阴性对照,作为质量控制标准,癌旁正常组织为正常对照组。
1.4 结果判定
Twist2在细胞质中阳性着色,阳性着色细胞会出现片状或颗粒状的胞质。结果采用半定量记分法判定[1],按阳性着色程度、阳性细胞所占比例分别评分,再用两者的乘积来判定结果:<4分为阴性表达,4~12分为阳性表达。
β-cadherin、E-cadherin在细胞膜上阳性着色 ......
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