蔡向杰 屈云萍 杨斯斯 冯玉康 王文鹏 姜国志

    1.神威药业集团有限公司，石家庄 051430；2.中药注射剂新药技术开发国家地方联合工程实验室，石家庄 051430

    山楂为蔷薇科落叶灌木或小乔木山楂(Crataegus pinnatifida Bge.var.major.N.E.Br.)山里红及野山楂(Crataegus cuneata Sieb.et Zucc.)的干燥成熟果实[1]，前两种习称“北山楂”，后一种习称“南山楂”。山楂性酸、甘，味温，归脾、胃、肝经，具有消食化积、活血化瘀的功效，主治食滞不化及产后淤阻腹痛[2-3]。山楂主要含总黄酮、表儿茶素和膳食纤维素。其中，表儿茶素类多酚物质具有抗癌活性[4-6]，还有很强的抗氧化作用，可有效清除自由基、预防脂质过氧化引起的动脉硬化和血栓形成，临床试验证明其疗效显著且安全无毒副作用[7-11]。目前对表儿茶素提取工艺的相关研究甚少，因此，本研究采用响应曲面法，优化山楂表儿茶素提取工艺参数，为山楂表儿茶素的开发提供参考。

    1 试剂与仪器

    1.1 试剂

    山楂药材购于平邑县原田金银花专业合作社，经河北省药品检验研究院孙宝惠老师检验鉴定为北山楂(Crataegus pinnatifida Bge)的干燥果实。表儿茶素对照品(批号：878-200102)购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用。甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮均为分析纯。

    1.2 仪器

    METTLER-ALC-210.4 电子分析天平(上海梅特勒托利多仪器有限公司)；Ultimate 3000 高效液相色谱仪(美国戴安公司)；HH-SB型电热恒温水浴锅(科伟仪器)；SHB-Ⅲ循环水式真空泵(郑州长城科工贸有限公司)。

    2 方法与结果

    2.1 山楂提取工艺

    取200 g 山楂，加入10 倍量一定浓度的有机溶剂加热回流提取3次，过200 目滤布合并上清液，回收溶剂，浓缩为干膏粉。

    2.2 山楂表儿茶素含量测定方法

    2.2.1 色谱条件与系统适用性试验[12-15]色谱柱：Diamonsil C18(5 μm，4.6 mm×150 mm)；流动相：0.04 mol/L 枸橼酸∶N，N-二甲基甲酰胺∶四氢呋喃(45∶8∶2，v/v/v)；检测波长：280 nm；柱温：30℃；流速：1.0 ml/min。

    2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取表儿茶素对照品加甲醇超声溶解并稀释至刻度 ......