N-乙酰半胱氨酸对兔肝缺血/再灌注损伤的保护作用
细胞膜,1材料与方法,1试剂与仪器,2实验动物与分组,3模型制作,4观察指标,5统计学分析,2结果,1两组不同时点HR,MAP的比较,2两组不同时点ALT,AST的比较,3两组不同时点MDA,SOD的比较,4两
戴大军 蔡俊赢1.江西省德安县中医院麻醉科,江西德安 330400;2.南昌大学第二附属医院麻醉科,南昌 330000
肝缺血/再灌注损伤是肝脏外科手术中常见的病理过程,尤其是肝脏移植手术,严重者可导致肝功能衰竭[1]。肝缺血/再灌注损伤的病理机制尚未明确,目前认为是多种因素共同作用的结果,如中性粒细胞和Kupffer 细胞被激活、细胞内钙超载[2]、氧自由基释放[3]、一氧化氮和内皮素水平失衡[4]、肝细胞凋亡等。本研究探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)清除氧自由基的作用[5-6]与缺血/再灌注损伤导致肝细胞凋亡之间的关系,揭示NAC 对肝缺血/再灌注损伤的保护机制。
1 材料与方法
1.1 试剂与仪器
丙二醛(MDA)测定试剂盒(南京建成生物科技有限公司),总超氧化物歧化酶(SOD)测定试剂盒(南京建成生物科技有限公司),凯基原位末端标记法细胞凋亡检测试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司),TKR-200C 小动物麻醉机(江西特力麻醉呼吸设备有限公司),全自动生化分析仪(日本Olympus-AU2700),飞利普G30 多功能监护仪。
1.2 实验动物与分组
选择周龄3~4 周,体重3.5~4.5 kg 的健康实验兔40 只(南昌大学实验动物科学部提供)。全部实验兔术前均禁食8 h,禁饮4 h。将其随机分为两组:肝缺血/再灌注组(I/R 组)和肝缺血/再灌注+N-乙酰半胱氨酸组(I/R+NAC 组)。I/R 组肝缺血30 min 后再灌注7 h;I/R+NAC 组于再灌注前5 min 泵注NAC 150 mg/kg,再灌注7 h 后持续泵注NAC 10 mg/(kg·h),I/R 组同时泵注等容量0.9%氯化钠[7]。两组实验兔在性别、周龄、体重、手术时间、出血量及输液量等方面比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.3 模型制作
所有实验兔先肌注氯胺酮13 mg/kg 基础麻醉,待麻醉成功后用飞利普G30 多功能监护仪监测兔心电图及血氧饱和度,并建立耳缘静脉通路,随后经静脉注射丙泊酚(2~4 mg/kg),维库溴铵(0.1~0.3 mg/kg)后行气管插管,接小动物麻醉机控制呼吸(潮气量=8 ml/kg,呼吸频率=15 次/min) ......
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