HPV感染与宫颈癌关系的研究(2)
1.2 HPV DNA检测1.2.1 检测设备和试剂盒 美国ABI公司PE9700扩增仪、德国QIAGEN公司医用核酸分子快速杂分仪;德国QIAGEN公司提供的HPV DNA抽提试剂盒及HPV基因分型检测试剂盒[可检测5种低危亚型(HPV6、HPV11、HPV42、HPV43、HPV 44)和13种高危亚型(HPV16、HPV18、HPV3l、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV56、HPV58、HPV59、HPV68)]。另外膜上还包括质量控制的阴性对照点、监测PCR反应的内对照点和用于监测显色系统的Biotin对照点。
1.2.2 标本DNA提取 收集子宫颈脱落细胞,置于HPV专用保存液中保持,取0.5 ml上述液体,离心 2 min,弃去上清液,用HPV DNA抽提试剂盒提取DNA,根据试剂盒操作说明书进行。
1.2.3 HPV亚型检测 采用HybrMax法[3]测定,将上述获得的HPV DNA扩增,把Taq酶、PCR MIX、水根据要求混匀 ......
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