降钙素原、中性粒细胞CD64指数检测在血液细菌感染性疾病中的诊断价值(2)
1.2方法采集全部研究对象EDTA-K2抗凝血1 ml,取流式专用试管,分别加入100 μl全血(EDTA-K2抗凝),溶血,再分别加入10 μl同型对照及CD64 FITC,均匀混合后20 min避光置存,两次PBS液洗涤,加入PBS溶液500 μl,静置15 min后放于流式细胞仪中检测,计算中性粒细胞CD64指数。另取全部研究对象2 ml空腹不抗凝静脉血,血清分离后置存,血液分析仪检测中性粒细胞。应用生化分析仪及配套质控品及试剂检测,根据操作说明书严格进行操作,半定量固相免疫层析法检测PCT,免疫透射比浊法检测C反应蛋白(CRP)水平。
1.3 仪器与试剂
日本SYSMEX XN-1000血细胞分析仪,日本TBA-120 FR生化分析仪,法国梅里埃Mini Vidas免疫酶化学发光仪,美国BD FACS Canto流式细胞仪,以上仪器公司提供配套试剂。
1.4 观察指标
各组血清PCT、CRP、中性粒细胞、中性粒细胞CD64指数等临床指标水平。
1.5 评估标准[3]
PCT>0.05 ng/ml,CRP>8.2 mg/L,中性粒细胞>70%,CD64指数>4,满足上述条件的均确定为相应指标阳性。
1.6 统计学处理
全部数据进行SPSS 18.0软件系统处理分析 ......
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