预缺血通过NMDA受体抑制海马CA1区线粒体内细胞色素c向胞质释放的研究(2)
1.2.3蛋白含量测定 按照改良Lowry′s法[14]，标准蛋白采用牛血清蛋白(BSA，组分ν)。
1.2.4免疫印迹(immunoblot，IB) 取分装好的含相同蛋白量的样品，分别加入1/3体积的4×蛋白上样缓冲液，沸水浴5 min变性。上样等量的100 μg变性蛋白质样品与凝胶孔中，经SDS-PAGE凝胶电泳分离后，电转至NC膜上，NC膜置以封闭液室温孵育3 h后，取出放入一抗工作液中孵育，4℃过夜，以TBST洗膜(5 min×3次)后，放入AP标记的二抗工作液中孵育，室温2 h，再以TBST洗膜(3 min×5次)，然后水洗，并放入以NBT/BCIP试剂盒新鲜配制AP显色液中显色，以流水洗涤终止显色。扫描NC膜上显色条带，并采用Quantity One软件分析。
1.3统计学处理
采用Image J 1.37、Sigma STAT32、Sigma PLOT9分析软件对数据进行处理，组间比较采用one-way ANOVA ......
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1.2.4免疫印迹(immunoblot，IB) 取分装好的含相同蛋白量的样品，分别加入1/3体积的4×蛋白上样缓冲液，沸水浴5 min变性。上样等量的100 μg变性蛋白质样品与凝胶孔中，经SDS-PAGE凝胶电泳分离后，电转至NC膜上，NC膜置以封闭液室温孵育3 h后，取出放入一抗工作液中孵育，4℃过夜，以TBST洗膜(5 min×3次)后，放入AP标记的二抗工作液中孵育，室温2 h，再以TBST洗膜(3 min×5次)，然后水洗，并放入以NBT/BCIP试剂盒新鲜配制AP显色液中显色，以流水洗涤终止显色。扫描NC膜上显色条带，并采用Quantity One软件分析。
1.3统计学处理
采用Image J 1.37、Sigma STAT32、Sigma PLOT9分析软件对数据进行处理，组间比较采用one-way ANOVA ......
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