关节腔注射用雷公藤甲素微球的制备与毒性评价(2)
1.3实验动物
健康新西兰兔,雌雄不限,体重(2.1±0.2)kg,由重庆医科大学实验动物中心提供,合格证号XCXK(渝)20120001。
1.4方法
1.4.1微球制备
采用溶剂挥发法制备TPL微球,将适量PLGA和TPL溶于二氯甲烷/甲醇的油相中,搅拌条件下缓慢滴加到含有一定量PVA的水相中,滴毕,继续搅拌5~10 min,形成油/水(O/W)乳剂,加入同体积超纯水,降低转速,继续搅拌4~6 h,待有机溶剂挥发完全后,微球固化。超速冷冻离心(12 000 r/min,4℃),洗涤,收集微球,冷冻干燥后即得微球干燥粉末。空白微球制备方法同上,不加TPL。
1.4.2微球形态观察
取1滴微球混悬液,超纯水分散,置铜网上,2%磷钨酸溶液染色,室温晾干,用透射电子显微镜(TEM)观察微球形态。
1.4.3微球粒径大小及其分布
取适量微球混悬于生理盐水中,用马尔文动态粒度分析仪测定粒径分布及平均粒径。
1.4.4傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析
对TPL、PLGA、TPL及PLGA物理混合物、TPL-PLGA微球 ......
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健康新西兰兔,雌雄不限,体重(2.1±0.2)kg,由重庆医科大学实验动物中心提供,合格证号XCXK(渝)20120001。
1.4方法
1.4.1微球制备
采用溶剂挥发法制备TPL微球,将适量PLGA和TPL溶于二氯甲烷/甲醇的油相中,搅拌条件下缓慢滴加到含有一定量PVA的水相中,滴毕,继续搅拌5~10 min,形成油/水(O/W)乳剂,加入同体积超纯水,降低转速,继续搅拌4~6 h,待有机溶剂挥发完全后,微球固化。超速冷冻离心(12 000 r/min,4℃),洗涤,收集微球,冷冻干燥后即得微球干燥粉末。空白微球制备方法同上,不加TPL。
1.4.2微球形态观察
取1滴微球混悬液,超纯水分散,置铜网上,2%磷钨酸溶液染色,室温晾干,用透射电子显微镜(TEM)观察微球形态。
1.4.3微球粒径大小及其分布
取适量微球混悬于生理盐水中,用马尔文动态粒度分析仪测定粒径分布及平均粒径。
1.4.4傅里叶变换红外光谱(FT-IR)分析
对TPL、PLGA、TPL及PLGA物理混合物、TPL-PLGA微球 ......
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