普伐他汀对人胰腺癌细胞SW1990的影响及其联合顺铂的抗瘤作用(2)

http://www.100md.com 2016年11月5日 《中国当代医药》2016年第31期

     1.3实验方法

    1.3.1 MTT比色法检测细胞增殖 将对数生长期细胞接种于96孔板，用含不同浓度普伐他汀的RPMI-1640培养基换液培养24、48、72 h。实验设空白对照组(空白培养基)、细胞对照组(不含普伐他汀)以及含1、5、10、15、25 μmol/L普伐他汀的处理组，每组设6个平行孔。培养完成后加入MTT液，继续培养4 h弃上清，上机于波长570 nm处测定吸光度(OD)值，并根据OD值计算细胞生长抑制率。生长抑制率(%)=(细胞对照组OD值-处理组OD值)/(细胞对照组OD值-空白对照组OD值)×100%。

    1.3.2流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡率 将对数生长期细胞接种于培养瓶中，加入0、5、15、25 μmol/L的普伐他汀处理48 h后收获细胞，采用流式细胞仪对细胞进行DNA分析，计算细胞周期的时相分布和凋亡率。

    1.3.3 MTT比色法检测普伐他汀联合顺铂对SW1990细胞的影响 将对数生长期的细胞制成单细胞悬液，接种于96孔板上。细胞贴壁生长后 ......