淀粉样变性肾病的病理诊断价值研究(2)
1.2方法
1.2.1电镜观察 应用3%戊二醛固定标本,包埋采用树脂,超薄切片,行枸缘酸铅和醋酸铀双染色,并应用TESCAN台式电镜(生产厂家:泰思肯贸易(上海)有限公司)观察,观察倍数一般为4万倍。
1.2.2免疫组化 应用EnVision两步法对免疫球蛋白轻链κ、λ的表达进行检测,选择Dako公司提供的抗体,采用Beckman Coulter UniCel DxI 800化学发光仪,按照说明书要求进行操作,其中淀粉样蛋白呈现出棕黄色则判断为阳性。
1.2.3免疫荧光 按照常规方法对组织切片進行冷冻,并且检测纤维蛋白(FRA)、补体Clq、C3以及免疫球蛋白IgM、IgA、IgG。
1.2.4组织化学 常规处理标本组织,石蜡包埋,切片后分别行高锰酸钾氧化刚果红、刚果红、六胺银(PASM)、Masson三色、PAS以及HE染色,染色倍数通常为1000倍。
1.3统计学处理
采用SPSS 14.0统计学软件对数据进行分析,计量资料以x±s表示,采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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1.2.1电镜观察 应用3%戊二醛固定标本,包埋采用树脂,超薄切片,行枸缘酸铅和醋酸铀双染色,并应用TESCAN台式电镜(生产厂家:泰思肯贸易(上海)有限公司)观察,观察倍数一般为4万倍。
1.2.2免疫组化 应用EnVision两步法对免疫球蛋白轻链κ、λ的表达进行检测,选择Dako公司提供的抗体,采用Beckman Coulter UniCel DxI 800化学发光仪,按照说明书要求进行操作,其中淀粉样蛋白呈现出棕黄色则判断为阳性。
1.2.3免疫荧光 按照常规方法对组织切片進行冷冻,并且检测纤维蛋白(FRA)、补体Clq、C3以及免疫球蛋白IgM、IgA、IgG。
1.2.4组织化学 常规处理标本组织,石蜡包埋,切片后分别行高锰酸钾氧化刚果红、刚果红、六胺银(PASM)、Masson三色、PAS以及HE染色,染色倍数通常为1000倍。
1.3统计学处理
采用SPSS 14.0统计学软件对数据进行分析,计量资料以x±s表示,采用t检验,计数资料采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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