应用小鼠灌胃针和点样吸头建立的大、小鼠肺泡灌洗新方法(2)
肺泡灌洗操作：①沿正中线剪开腹部和颈部皮肤，分离大鼠肺和气管组织。将气管和肺组织置于直径100 mm培养皿中，先将1#手术线打结放在距离气管切口端5 mm左右位置，然后将经过灭菌处理的小鼠灌胃针插入到大鼠气管中，同时用力系紧之前在近气管切口端的打结(图1)。取注射器抽取预冷的不含钙镁离子的PBS缓冲液5 ml注入肺腔，轻轻按摩肺脏，停留20 s后再缓慢回抽支气管肺泡灌洗液。以上操作重复10次，25～40 ml液体。② 置于4℃离心机以1000 r/min，离心10 min，后弃上清液。③ 10%小牛血清的RPMI1640细胞培养液悬浮细胞，经过培养后，贴壁生长的大鼠肺泡巨噬细胞可以进行下一步的实验研究。
1.2.2 小鼠肺泡灌洗操作方法 实验准备：首先进行插管器具处理，即用剪刀减掉吸头末端约5 mm，在实验操作之前完成Thermo吸头与1 ml注射器的吻合要求，注意一定要吻合良好(如果剪刀剪去的长度不合适，会使吸头与注射器的吻合性差，灌洗时发生漏液)。处理好吸头后，与其他实验器具一并灭菌。CB17-SCID鼠处死(小鼠摘眼球法采集外周血)，固定鼠板后喷洒适量75%乙醇，在无菌条件下进行支气管肺泡灌洗术。
肺泡灌洗操作：①沿正中线剪开腹部和颈部皮肤，分离小鼠肺和气管组织。将气管和肺组织置于直径60 mm培养皿中，先将1#手术线打结放在在气管切口端5 mm左右位置，然后将经过剪切及灭菌处理的吸头插入到小鼠气管中，同时用力系紧之前在近气管切口端的打结(图2)。取注射器抽取预冷的不含钙镁离子的PBS缓冲液1 ml注入肺腔 ......
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1.2.2 小鼠肺泡灌洗操作方法 实验准备：首先进行插管器具处理，即用剪刀减掉吸头末端约5 mm，在实验操作之前完成Thermo吸头与1 ml注射器的吻合要求，注意一定要吻合良好(如果剪刀剪去的长度不合适，会使吸头与注射器的吻合性差，灌洗时发生漏液)。处理好吸头后，与其他实验器具一并灭菌。CB17-SCID鼠处死(小鼠摘眼球法采集外周血)，固定鼠板后喷洒适量75%乙醇，在无菌条件下进行支气管肺泡灌洗术。
肺泡灌洗操作：①沿正中线剪开腹部和颈部皮肤，分离小鼠肺和气管组织。将气管和肺组织置于直径60 mm培养皿中，先将1#手术线打结放在在气管切口端5 mm左右位置，然后将经过剪切及灭菌处理的吸头插入到小鼠气管中，同时用力系紧之前在近气管切口端的打结(图2)。取注射器抽取预冷的不含钙镁离子的PBS缓冲液1 ml注入肺腔 ......
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