硅酮凝胶对小型猪瘢痕模型血管内皮生长因子表达的影响(2)
1.3.2瘢痕组织中VEGF表达的检测(SP法) 标本在4%多聚甲醛中固定48 h后,脱水、石蜡包埋、切片,厚5 μm。石蜡切片脱蜡复水,蒸馏水冲洗,于pH为6.0的枸橼酸中行抗原热修复,PBS冲洗,3%过氧化氢孵育10 min,PBS冲洗,10%山羊血清封闭10 min,倾去加入一抗(1∶100),4℃孵育过夜,PBS冲洗3次,生物素标记的二抗工作液37℃孵育15 min,PBS冲洗3次,辣根过氧化物酶标记37℃温箱孵育15 min,PBS冲洗3次,DAB染色,显微镜观察后彻底冲洗,苏木素复染返蓝,中性树酯常规封片。以PBS代替一抗作为阴性对照,操作同上述步骤。将每张切片在光镜下随机选取5个高倍视野(×400),采用Image-Pro Plus 6.0图像分析系统以同一模式计算表达的光密度值作为其表达强度进行分析。
1.4统计学方法
采用SPSS 16.0统计软件对数据进行处理,计量资料以x±s表示,两样本均数比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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1.4统计学方法
采用SPSS 16.0统计软件对数据进行处理,计量资料以x±s表示,两样本均数比较采用t检验,以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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