分子生物学方法鉴别川贝母及饮片的技术要点探析(3)
实验完成后应妥善处理所产生的废弃物,该实验所使用的试剂有少量生物毒性,建议用过的枪头、试剂瓶、离心管、凝胶等废弃物,均应按照生物废弃物或医疗废弃物妥善处理,以免污染环境或对他人造成伤害。
3常见问题探析
3.1 引物聚合物问题
在电泳之后所得到的胶图上,常会在<100 bp的位置出现一条带(图1),为引物聚合物的条带,是在PCR反应期间,一部分引物之间相互聚合所产生的。
3.2 胶图中除目标条带外,出现多条条带
如图2所示,除100~250 bp的两条目标DNA条带外,还有些杂乱不明显的条带,通常是由于实验过程中的操作不规范,样品被污染,出现其它物种的DNA条带。实验前的灭菌过程和实验过程中的规范操作是保证样品不被污染的重要条件。
3.3胶图中的条带出现弥散的情况
可能原因有两点:一方面可能是制胶所用缓冲液与电泳缓冲液不一致,应保持一致;另一方面,可能是電泳缓冲液长期未更换,缓冲盐浓度变化,或缓冲液被污染,应及时更换缓冲液。
3.4 设置污染区的问题
虽然显色剂GelRed毒性较小 ......
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3常见问题探析
3.1 引物聚合物问题
在电泳之后所得到的胶图上,常会在<100 bp的位置出现一条带(图1),为引物聚合物的条带,是在PCR反应期间,一部分引物之间相互聚合所产生的。
3.2 胶图中除目标条带外,出现多条条带
如图2所示,除100~250 bp的两条目标DNA条带外,还有些杂乱不明显的条带,通常是由于实验过程中的操作不规范,样品被污染,出现其它物种的DNA条带。实验前的灭菌过程和实验过程中的规范操作是保证样品不被污染的重要条件。
3.3胶图中的条带出现弥散的情况
可能原因有两点:一方面可能是制胶所用缓冲液与电泳缓冲液不一致,应保持一致;另一方面,可能是電泳缓冲液长期未更换,缓冲盐浓度变化,或缓冲液被污染,应及时更换缓冲液。
3.4 设置污染区的问题
虽然显色剂GelRed毒性较小 ......
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