吡格列酮、高糖对3T3—L1细胞中p—Perilipin 1A蛋白表达的影响(2)
1材料与方法
1.1主要试剂
3T3-L1前脂肪细胞株(美国模式培养物集存库提供)、葡萄糖(北京益利精细化学品有限公司)、地塞米松(D4902)、1-甲基-3-异丁基-黃嘌(I5879)、无酚红DMEM培养基(美国Sigmag公司)、胰蛋白酶、5 mmol/L无酚红葡萄糖(DMEM)培养基(美国Gibco公司)、兔抗牛p-Perilipin 1A抗体(北京博奥森生物技术公司)、胰岛素(诺和诺德公司)、吡格列酮(原料，纯度99.3%，江苏涟水制药有限公司)、胎牛血清(美国PAA公司)、甘油检测试剂盒(上海超研生物科技有限公司)、Western blot试剂盒(上海经科化学科技有限公司)。
1.2实验方法
1.2.1 3T3-L1前脂肪细胞的培养和诱导分化 3T3-L1前脂肪细胞以含10%胎牛血清(DMEM)培养基，在室温、体积分数为0.07的CO2的条件下培养。细胞融合率为80%～90%时，行传代接种。细胞融合后，加含诱导液(地塞米松、胰岛素、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤)的DMEM培养液再孵育2 d；然后以含10 μg/ml胰岛素的DMEM培养液孵育2 d ......
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1.1主要试剂
3T3-L1前脂肪细胞株(美国模式培养物集存库提供)、葡萄糖(北京益利精细化学品有限公司)、地塞米松(D4902)、1-甲基-3-异丁基-黃嘌(I5879)、无酚红DMEM培养基(美国Sigmag公司)、胰蛋白酶、5 mmol/L无酚红葡萄糖(DMEM)培养基(美国Gibco公司)、兔抗牛p-Perilipin 1A抗体(北京博奥森生物技术公司)、胰岛素(诺和诺德公司)、吡格列酮(原料，纯度99.3%，江苏涟水制药有限公司)、胎牛血清(美国PAA公司)、甘油检测试剂盒(上海超研生物科技有限公司)、Western blot试剂盒(上海经科化学科技有限公司)。
1.2实验方法
1.2.1 3T3-L1前脂肪细胞的培养和诱导分化 3T3-L1前脂肪细胞以含10%胎牛血清(DMEM)培养基，在室温、体积分数为0.07的CO2的条件下培养。细胞融合率为80%～90%时，行传代接种。细胞融合后，加含诱导液(地塞米松、胰岛素、1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤)的DMEM培养液再孵育2 d；然后以含10 μg/ml胰岛素的DMEM培养液孵育2 d ......
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