丙戊酸对HL—60/HT细胞耐药性的影响(2)
1.4 耐药的稳定性测定
将HL-60/HT传代细胞在不含药物的RPMI 1640完全培养基培养2个月，取对数生长时期的细胞，测定细胞对HT的IC50，方法同“1.3”，分析HL-60/HT细胞获得性耐药的稳定性。
1.5 流式细胞仪测细胞周期
设Ara-C作用HL-60细胞组和HL-60/HT细胞组、VPA作用HL-60细胞组和HL-60/HT细胞组、VPA+Ara-C作用HL-60细胞组和HL-60/HT细胞组，分别用流式细胞仪测定Ara-C组、VPA组、VPA+Ara-C组对HL-60/HT细胞和HL-60细胞的细胞周期影响。用PBS缓冲液重悬待检细胞，使细胞密度调整为1×106/ml。取细胞悬液0.5 ml，加入70%冰乙醇2 ml ，4℃过夜，2000×g转速离心5 min后，弃去上清液，用PBS缓冲液洗涤2次，依次加入50 μl 浓度为50 mg/L的RNA酶、450 μl浓度为50 mg/L的碘化丙啶(PI)，37℃避光1 h，用流式细胞仪测定细胞周期。
1.6 统计学分析
所有数据均采用SPSS 12.0统计学软件处理，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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将HL-60/HT传代细胞在不含药物的RPMI 1640完全培养基培养2个月，取对数生长时期的细胞，测定细胞对HT的IC50，方法同“1.3”，分析HL-60/HT细胞获得性耐药的稳定性。
1.5 流式细胞仪测细胞周期
设Ara-C作用HL-60细胞组和HL-60/HT细胞组、VPA作用HL-60细胞组和HL-60/HT细胞组、VPA+Ara-C作用HL-60细胞组和HL-60/HT细胞组，分别用流式细胞仪测定Ara-C组、VPA组、VPA+Ara-C组对HL-60/HT细胞和HL-60细胞的细胞周期影响。用PBS缓冲液重悬待检细胞，使细胞密度调整为1×106/ml。取细胞悬液0.5 ml，加入70%冰乙醇2 ml ，4℃过夜，2000×g转速离心5 min后，弃去上清液，用PBS缓冲液洗涤2次，依次加入50 μl 浓度为50 mg/L的RNA酶、450 μl浓度为50 mg/L的碘化丙啶(PI)，37℃避光1 h，用流式细胞仪测定细胞周期。
1.6 统计学分析
所有数据均采用SPSS 12.0统计学软件处理，计量资料用x±s表示，采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义 ......
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