作为CCR4的高亲和力受体，趋化因子CCL17和CCL22虽然在很多方面有相似性，但其在免疫系统中的调节作用却各有不同，因趋化因子主要是通过与其受体结合而发挥作用，而很多研究都是将CCR4基因沉默，同时抑制了CCL17和CCL22的功能，笔者分别针对人源CCL17和CCL22基因设计靶向CRISPR-sgRNA敲除质粒，从而能更好地对趋化因子各自的功能进行更彻底的相关性研究[14]。

    CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic reapeat/CRISPR-associated nuclease 9)系统是一种继锌指核酸酶之后的可对基因组进行靶向修饰的新型编辑技术，其开发具有成本低、易于构建、编辑效率高等优势，在研究中的应用更为广泛[15-17]。本实验选用CRISPR/Cas9系统对人源性趋化因子CCL17和CCL22基因进行了基因编辑方面的探索性研究，旨在为后续趋化因子CCL17和CCL22的相关研究奠定基础。

    1材料和方法

    1.1材料

    pX458质粒为实验室保存菌种；大肠埃希菌DH5α感受态购自广州TAKARA代理公司；pGEM-T Easy Vector与T4DNA连接酶购自Promega公司；AxyPrep DNA Gel Extraction Kit与PCR Cleanup Kit试剂盒购自AXYGEN公司；BbsⅠ限制性内切酶与DNA聚合酶购自广州NEB代理公司；引物与sgRNA均由英潍捷基公司合成 ......